目的:糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）是导致终末期肾脏病（end-stage renal disease,ESRD）的主要病因。临床表现为蛋白尿、肾功能进行性衰退,最终发展为肾衰竭。其特征性病理改变为肾小球基底膜增厚、系膜基质增生、K-W结节形成、肾小球硬化。2010年美国肾脏病理协会（RPS）依据肾小球系膜增生硬化程度,将DKD分为4级,至今仍被广泛应用。然而,最近研究显示,RPS分级对预后无明显提示意义,而毛细血管外细胞增生（Extracapillary hypercellularity,EXHC）是DKD患者不良预后的独立危险因素。但EXHC与DKD患者的临床病理联系及其形成机制等问题尚未解决。1.本研究通过分析DKD患者肾小球EXHC病变与基线临床生化指标、病理形态的相关性,探究糖尿病肾小球EXHC形成的临床病理意义。2.通过分析EXHC细胞成分及足细胞表型改变,进一步探究足细胞表型改变与EXHC形成的关系及其分子机制。方法:1.糖尿病EXHC形成的临床病理联系1)研究对象:肾穿刺活检病理诊断为DKD,形态学伴EXHC和不伴EXHC形成的病例各25例,收集其相关临床、病理资料。2)临床资料:（1）一般资料包括性别、年龄、确诊糖尿病至肾活检的时间、血压等。（2）生化指标包括血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白-胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、24小时尿蛋白定量（24h UP）、血清白蛋白（Alb）、血清肌酐（SCr）等。3)病理学方法:（1）常规HE及特殊染色:肾活检组织行HE、PASM、PAS及MASSON染色,光镜观察并统计分析肾组织病理形态学表现:肾小球系膜增生程度、K-W结节小球数、EXHC小球数、肾小管萎缩面积、间质纤维化及炎症程度、小动脉硬化程度。（2）免疫组织化学法:应用collagen IV抗体染色,观察肾小球及肾间质阳性范围。（3）免疫荧光:直接免疫荧光法检测IgG、IgA、IgM,C3、C1q,Alb、Fib的表达和定位。2.EXHC形成的机制研究1)免疫组织化学套染PAS染色:检测25例伴EXHC的DKD肾活检组织连续切片中肾小球WT1、PAX2、CK、SMA、CD45、CD68、Nephrin、Synaptopodin的表达,观察并统计上述指标阳性细胞百分比。2)透射电镜:观察并分析EXHC组（9例）和非EXHC组（10例）DKD患者肾组织超微结构改变,测量肾小球基底膜厚度,计数足突数并计算足突平均宽度（FPW）。3)免疫组织化学方法检测并观察肾小球毛细血管外增生细胞HIF1α的表达。结果:1.糖尿病EXHC形成的临床病理联系1)2018年1月1日至2020年12月31日我中心接受肾脏活检的患者共2561例,其中诊断为DKD的患者占6.56%（168例）,20.8%的DKD患者合并非糖尿病肾脏病,21%的DKD单发患者肾小球存在EXHC病变。2)EXHC组患者平均年龄是52岁（31-72岁）,男女比例是18:7,糖尿病病程从1年到30年不等（8.36±8.53）。与对照组相比,EXHC组24小时蛋白尿、血肌酐、HDL、血尿素水平更高,血清白蛋白水平更低（P<0.05）,两组间糖尿病病程、血糖浓度、Hb A1C、血尿素氮无明显差异。3)与对照组相比,EXHC组系膜增生、系膜溶解、小动脉硬化、间质纤维化和炎症程度更重,存在K-W结节的肾小球占比更高（P<0.05）,两组间球性硬化、节段性硬化小球比例无明显差异。所有病例均无免疫球蛋白沉积。2.EXHC形成的机制研究1)DKD中的EXHC主要表达足细胞标记蛋白（WT1）和壁层上皮细胞标记蛋白（PAX-2）,部分细胞同时表达这两种细胞标记物,个别细胞表达肌成纤维细胞标记（SMA）。2)伴EXHC的毛细血管袢足细胞特异性蛋白（nephrin、synaptopodin）表达丢失,硬化肾小球表达完全丢失,不伴EXHC的毛细血管袢表达完整。3)超微电镜显示与非EXHC组相比,EXHC组FPW更大（P<0.05）,两组之间基底膜厚度无明显差异。4)EXHC细胞高表达HIF1α。结论:1.糖尿病肾小球EXHC发生率较高,DKD患者肾小球EXHC形成与肾功能下降、肾小球系膜增生、肾间质纤维化和小动脉硬化密切相关。2.EXHC可能由壁层上皮细胞和足细胞组成,足细胞表型改变、壁层上皮细胞反应参与EXHC形成,HIF1α可能参与EXHC的形成。