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内脂素(Visfatin)是一种脂肪细胞因子。研究发现，Visfatin与糖尿病、肥胖、炎症以及代谢综合征有着紧密的联系，其与炎症反应的相关研究已成为一个新的热点，而p38信号通路作为MAPK通路里的一个亚型，是炎症反应中的一个重要参与者。本研究用LPS刺激构建免疫应激引起的炎症模型，通过观察Visfatin对细胞活性和相关炎症因子的影响，Visfatin和p38信号通路之间的关系，以明确Visfatin在参与炎症反应时的作用及途径，为探寻Visfatin在治疗炎症疾病方面提供新的思路。具体研究内容及结果如下: 1.Visfatin和LPS对RAW264.7细胞形态和活力的影响MTT试验结果发现，随着Visfatin和LPS浓度的改变，RAW264.7细胞形态、数量和活力均发生变化。当Visfatin浓度达到200ng/mL，细胞数量明显增加，以圆形细胞为主，细胞聚集生长，而且细胞活力达到峰值(P＜0.01); Visfatin浓度超过200ng/mL时，细胞数量明显减少，许多细胞体积变大，细胞内出现空泡，细胞活力开始下降。当LPS的浓度达到10 ug/mL时，细胞伪足增多，许多细胞体积变大，细胞出现空泡，部分细胞破裂，细胞的活力最强(P＜0.05);继续加大LPS的剂量，细胞中空泡更为明显，破裂的细胞也显著增多，细胞的活力显著下降;在50ug/mL时细胞活力已经小于对照组的细胞活力，说明高剂量的Visfatin和LPS对RAW264.7细胞有一定的毒性作用。 2.不同组RAW264.7细胞内IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的表达ELISA结果显示，与对照组相比，Visfatin的加入可以显著上调IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α(P＜0.05)的表达;在LPS组中，IL-1β、IL-10、TNF-α的表达与比对照组相比有明显增加(P＜0.05);而与LPS组相比，在Visfatin+LPS组中IL-1β、IL-10、TNF-α的表达显著下降(P＜0.05)。 3.不同组大鼠肝脏中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的表达体内试验结果显示，和生理组相比，Visfatin和LPS组中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的表达均显著升高(P＜0.01);与LPS组相比，Visfatin+LPS组中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α却显著下降(P＜0.01);其中肝脏中IL-1β、IL-10、TNF-α的表达规律和细胞试验中的结果一致。 4.不同处理组大鼠肝脏内髓过氧化物酶的表达免疫组化结果显示，MPO阳性产物呈棕褐色，细胞质和细胞核中均有分布。肝脏中分布广泛，主要位于肝脏门管区附近。数据统计结果表明，与生理盐水组相比，visfatin组的MPO显著减少(P＜0.05)，而LPS组肝脏中MPO略为减少，差异不显著(P＞0.05)，而和LPS组相比，在visfatin+LPS组肝脏中的MPO却显著减少(P＜0.05)。结果表明visfatin可以减少肝脏中MPO的表达，而在LPS刺激后，visfatin更是减少了MPO的表达。 5.Visfatin对p38信号通路的影响添加p38的抑制剂SB203580之后，与单独加入Visfatin相比，IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α均发生了显著下调(P＜0.01)，结果表明Visfatin是通过p38信号通路来调节IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的表达的。 Western Blot试验结果显示，与PBS组相比，Vifatin组中p38的表达水平显著升高(P＜0.05);与LPS组相比，Visfatin+LPS组的p38水平显著升高(P＜0.05)。而在观察P-p38的表达时发现，与PBS组相比，Visfatin组中的P-p38的表达显著下降(P＜0.05);与LPS组相比，Visfatin+LPS组的P-p38水平显著下降(P＜0.05)。结果表明Visfatin可能是通过上调p38和下调P-p38的表达来调节机体的炎症反应的。