论文部分内容阅读
目的：脓毒血症是现今重症监护病房中常见的也是最严重的并发症之一。感染导致脓毒症以及合并MODS是危重患者主要的死亡原因。其已成为重症医学的首要问题,全球脓毒血症死亡率28%左右,但不同年龄有所不同：儿童10%、成年人38%、老年则85%。我国目前缺乏详细的临床流行病学资料,但据推算,每年可能有300万例患者发生脓毒血症。本实验的目的是为了了解脓毒血症患者血清PCT水平,依据血清中PCT水平确定脓毒血症与全身炎症反应综合征判定的界限值,研究其与脓毒血症预后的相关性；研究IL-10基因单核苷酸多态性(SNP)的-1082G/A、-592C/A位点基因频率分布与脓毒血症易感性的关系。揭示IL-10基因多态性与脓毒血症关系,为其发病机制及预防研究提供科学依据,基因多态性研究将为我们深入剖析脓毒血症的发病机制,探索疾病表型的多样性,及其产生的本质,发展更具个体化的临床治疗措施开辟一个新的途径。方法病例采用对照研究的方法,采集病例组70例和正常对照组30例,依诊断标准分成脓毒血症组、全身炎症反应综合征组和对照组,清晨空腹取外周血,测定血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(N),血沉(ESR)水平,比较之间是否有统计学差异。取各组研究对象外周血白细胞,提取基因组DNA,采用扩增阻滞突变系统聚合酶链反应(ARMS-PCR)和扩增限制性内切酶长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测IL-10基因上-1082G/A、-592C/A位点基因型和等位基因,共两个SNP的基因多态性。由此推断脓毒血症血清PCT水平判定的界值及与预后的相关性,为二者的诊治提供指导性意见；研究IL-10基因启动子区域中-1082G/A、-592C/A基因多态性与脓毒血症及全身反应综合症易感性。结果1.健康组血清PCT均低于0.5 ng/ml, SIRS组血清PCT水平有52.5%增高,增高浓度多在0.5-2.0 ng/ml,脓毒血症组90%患者则明显增高,其增高浓度多在2.0-10.0ng/ml;设PCT大于0.5ng/ml为阳性值,以脓毒血症组患者的PCT值阳性率明显高于SIRS组(P<0.05),这一结果证明了PCT检测的临床意义。将患者血清PCT水平依据PCT>2 ng/ml分成两组进行比较。说明以PCT>2 ng/ml为诊断脓毒血症的标准,其阳性预测值为78.6%,敏感度(Pa)、特异度(Pd)及准确性(CA)均较高,分别为73.3%,85%,80%,以PCT为依据诊断脓毒血症的漏检率仅为26.7%,误诊率也较低为15%。在临床中应用能较好的对脓毒血症进行诊断和判定；将脓毒血症患者依据转出重症监护病房或出院时病情明显改善或改善为预后良好组,无改善或死亡为预后不良组。预后良好组86%的患者血清PCT值低于10.0 ng/ml,预后不良组66.7%的患者血清PCT值大于10.0 ng/ml,预后不良组APACⅡ评分明显高于预后良好组,PCT水平对于评价脓毒血症预后要优于CRP、WBC,高水平的血清PCT值不利于脓毒血症预后的发展。2. IL-10-1082G/A基因型(GG. GA、AA)在脓毒血症组、SIRS组和对照组的频率分别为AA型70%、70%和80%、GA型23.3%、25.0%和16.7%、GG型6.7%、5.0%和3.3%；IL-10-592位点AA、CA、CC3种基因型频率在脓毒血症组、全身炎症反应综合征组和对照组中分布为AA型70.0%、50%和40%、CA型20%、40%和33.3%、CC型10%、10%和26.7%。等位基因(C、A)在三组的频率分别为20%、30%、43.3%和80%、70%、56.7%：分析发现,IL-10基因组上SNP中在国人中出现的频率不尽相同,与国外人群相比明显不同,-1082A的频率远远高于其他人群；-1082G/A基因型及A和G等位基因的频率在脓毒血症组、SIRS组和对照组三组间均无显著性差异(P>0.05).脓毒血症组-592AA基因型频率与对照组比较,高于对照组,且差异有显著性意义(P<0.05),-592C等位基因的频率与对照组比较,明显低于对照组,差异有极显著性意义(P<0.05)。从而推断脓毒血症患者基因组中高频率的-592AA基因型促使IL-10低水平分泌,虽然一592C相对于一592A为IL-10高表达型等位基因,但其表达频率明显低于健康人群,二者共同作用使脓毒血症患者处于IL-10的低水平状态,对促炎性细胞因子的释放抑制作用相对较弱,炎性细胞因子的大量释放,增大的患脓毒血症的危险性。所以IL-10中-592AA基因型与脓毒血症的发病相关。单体型AC脓毒血症组、SIRS组和对照组三组间有显著性差异(P<0.05),明显低于对照组,该单体型脓毒血症组、SIRS组间有显著性差异(P<0.05)；单体型AA脓毒血症组、SIRS组和对照组比较有显著性差异(P<0.05),但二者之间无显著性差异(P>0.05)。AA单体型脓毒血症组明显低于对照组,证实了ATA单倍型与IL-10产生减少有关。单体型AC也可能与脓毒血症的发病风险性相关结论1.PCT可作为早期全身炎症反应综合征与脓毒血症的快捷、敏感、准确的检测手段；PCT>2 ng/ml可作为诊断脓毒血症的判定点,具有较高的阳性预测值、敏感度、特异度及准确性；PCT水平可较好的判断脓毒血症预后,要优于CRP和WBC,高PCT水平不利于脓毒血症的预后发展。2.IL-10基因-1082G/A位点基因型及A和G等位基因与脓毒血症易感性无关,IL-10-592AA基因型与脓毒血症的发生发展有关,单体型AA、AC型患者发生脓毒血症的机率可能高于其它患者。