大紫菇菌丝体多糖诱导肝癌细胞凋亡的研究

来源 :佳木斯大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanyi1983
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目的:对大紫菇菌丝体进行成分分析,提取大紫菇菌丝体多糖,探讨大紫菇菌丝体多糖对肝癌细胞的促凋亡作用,为临床上开发抗肿瘤的新药提供了理论依据。 方法:本课题通过液体深层发酵培养大紫菇菌丝体,采用定性分析方法分析大紫菇菌丝体的成分。大紫菇菌丝体多糖作用SMMC-7721肝癌细胞后,通过对肿瘤细胞形态观察、MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫组织化学观察bcl-2蛋白表达等方法来探讨大紫菇菌丝体多糖抗肿瘤作用。 结果:1、大紫菇菌丝体富含有多种生物活性成分。 2、细胞形态学变化电镜下观察:用药前可见肿瘤细胞结构完整。大紫菇菌丝体多糖0.625g/l作用48h核变形,细胞膜起泡。大紫菇菌丝体多糖1.25g/l作用48h核固缩,染色质边集,形成凋亡小体。 3、从生长曲线上可看出大紫菇菌丝体多糖抑制细胞生长。 4、DNA凝胶电泳经大紫菇菌丝体多糖0.625g/l作用48hDNA电泳呈模糊条带,大紫菇菌丝体多糖1.25g/l作用48hDNA电泳,呈梯状改变,证明大紫菇菌丝体多糖诱导肝癌细胞凋亡呈正相关。 5、bcl-2表达的检测实验组bcl-2表达减少,对照组bcl-2表达较高,细胞内呈强阳性反应。 结论:1、深层发酵培养的大紫菇菌丝体经过定性试验证明:富含有多种生物活性成分。结果显示可能含有:糖、多糖、甙类、氨基酸、酚、儿茶酚鞣质、强心苷、有机酸、甾体、三萜类、脂肪油、游离黄酮或黄酮甙、不饱和化合物。 2、大紫菇菌丝体多糖作用肝癌细胞后,通过对肿瘤细胞形态观察、MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫组织化学观察bcl-2蛋白表达等方法证明:大紫菇菌丝体多糖促进肝癌细胞发生凋亡。
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