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目的金属合金作为口腔修复材料应用于人体内在人体生理环境中使用对生命有机体会产生一定的作用和影响。生物相容性评价是研究医用金属材料的重要内容之一。本研究从细胞生物学及分子生物学角度对6种金属合金的生物相容性进行评价:1.本研究主要通过细胞培养及流式细胞术检测来了解金属合金对于L929细胞的细胞周期及凋亡方面的影响进而评价其生物相容性。2.通过RT-PCR检测Bcl-2和Bax mRNA表达探讨金属合金引起细胞凋亡的机制,同时为提出生物相容性评价的新指标提供理论依据。材料与方法1、细胞培养L929细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养基在37℃、5%CO2的培养箱中培养并传代。2、流式细胞仪测细胞周期将6种金属合金浸提液及阴性对照与L929细胞培养24、48小时后进行PI染色,并通过流式细胞仪检测不同实验组细胞周期的改变。3、凋亡细胞荧光检测将L929细胞接种于6孔培养板中并用金属合金浸提液培养48小时,经Annexin V-EGFP及PI染色进行双染后于荧光显微镜下观察凋亡细胞。4、流式细胞仪测细胞凋亡将6种金属合金浸提液及阴性对照与L929细胞培养24、48小时后进行Annexin V-EGFP及PI染色,并通过流式细胞仪检测细胞凋亡。5、RT-PCR将6种金属合金浸提液及阴性对照与L929细胞培养48小时,用RT-PCR检测细胞Bcl-2和Bax的mRNA表达。结果1、金属合金对于L929细胞细胞周期的影响培养48小时后各组细胞表现出不同的增殖趋势,其中金合金组和阴性对照组G2期比例最高,其它各组依次为钴铬合金组>2号钢组>银钯合金组>镍铬合金组>3号钢组。2、金属合金对于L929细胞凋亡的影响实验组细胞经Annexin V-EGFP和PI染色,经荧光显微镜观察可见凋亡细胞。流式细胞仪检测结果表明各组间细胞凋亡率不同。其中金合金组细胞凋亡率最低并且接近与阴性对照组,其它金属合金凋亡率远高于金合金其中镍铬合金引起的凋亡率最高且远高于阴性对照组,其顺序为金合金<钴铬合金<2号钢<3号钢<银钯合金<镍铬合金。3、金属合金对L929细胞Bcl-2和Bax mRNA的表达的影响各实验组细胞Bcl-2和Bax mRNA的表达不同。Bcl-2/Bax的比值由高到低依次为:阴性对照组>金合金组>钴铬合金组>2号钢组>镍铬合金组>银钯合金组>3号钢组。结论1、金属合金可能引起L929细胞细胞周期的改变。2、金属合金可能引起L929细胞凋亡以及Bcl-2、Bax mRNA表达的改变并且不同金属合金之间存在差异。3、细胞周期、细胞凋亡和Bcl-2、Bax mRNA的表达的检测可能成为评价金属合金的生物相容性指标之一。4、6种金属合金的生物相容性评价为:金合金、钴铬合金、2号钢生物相容性较好,而银钯合金、镍铬合金、3号钢生物相容性较差。5、2号钢为新材料具有较佳生物相容性。