【摘 要】
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目的:研究乳腺癌组织中抑癌基因TSG101及其四种剪接变异体的表达规律及突变,探讨此基因在乳腺癌发生发展过程中扮演的角色。 方法:对手术切除的24例新鲜乳腺癌组织进行总R
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目的:研究乳腺癌组织中抑癌基因TSG101及其四种剪接变异体的表达规律及突变,探讨此基因在乳腺癌发生发展过程中扮演的角色。 方法:对手术切除的24例新鲜乳腺癌组织进行总RNA抽提,设计5对针对TSG101基因全长及其四种剪接变异体(V_A、V_B、V_C和V_D)特异引物作RT-PCR,PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳观察分析目的产物,设计引物对TSG101基因全长PCR产物进行测序(663bp～1276bp),结果与基因库TSG101基因序列比对分析。四种剪接变异体用各自的扩增引物测序,以确定获得的为目的产物。 结果:在24例组织中均扩增出了TSG101全长及四种剪接变异体片断。24例乳腺癌组织中TSG101剪接变异体C表达的差异最小,剪接变异体A、B及TSG101全长的表达差异次之,剪接变异体D的表达差异最大。测序结果24例组织中20例(83.3%)经序列比对与基因库的TSG101mRNA序列100%一致,另4例(16.7%)均于TSG101基因第4外显子mRNA第798bp处存在“C→T”杂合性点突变。 结论:1、24例乳腺癌组织均有TSG101基因全长及V_A、V_B、V_C和V_D四种剪接变异体的表达,各成分的表达存在不同程度的差异,以V_C差异最小,V_D差异最大。上述差异与乳腺癌生物学特性的关系有待进一步研究和阐明。2、16.7%(4/24)乳腺癌病例存在TSG101mRNA第798bp位碱基“C→T”的杂合性点突变,此发现为国内外首次报道,其可能为乳腺癌发生的分子遗传基础提供了新线索。
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