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植物病原线虫每年给农业造成的损失十分严重,生防真菌是重要的线虫生防资源。但是土壤抑菌作用使生防真菌的孢子很难在土壤中萌发生长繁殖,在实际的应用中存在着防效低和不稳定的问题。为了研究土壤抑菌作用抑制真菌孢子萌发的分子机制,首先,本论文以捕食线虫真菌Arthrobotrys oligospora为研究对象,通过iTRAQ-LC-MS/MS蛋白组学技术测定了被土壤悬液抑制萌发的孢子的蛋白组,在蛋白组层面分析土壤抑制寡孢孢子萌发的分子机制。其次,在实验室前期研究已经做的土壤抑菌物质苯甲醛和氨气分别抑制寡孢节丛孢分生孢子萌发的蛋白组数据中,我们筛选出了 6个重要的与孢子萌发相关的蛋白编码基因（AOLs00169g229、AOL-s00215g160、AOL-s00075g181、AOL-s00083g51、AOLs00075g106、AOLs00215g7）利用同源重组的方法进行了敲除。之后对敲除株的生长速率、产孢情况、孢子萌发率以及抗逆性进行了研究。本研究为最终揭示土壤抑制寡孢节丛孢孢子萌发的分子机理进行了一些有益的探索。主要研究结果:1、经过iTRAQ定量蛋白质组学分析,以2倍和0.5倍筛选表达上调和下的蛋白,结果发现:萌发24h孢子与未萌发孢子相比,上调蛋白质211个,下调蛋白质102个;土壤悬液抑制萌发的孢子与未萌发孢子相比,上调蛋白质43个,下调蛋白质45个。两个比较组中有14个蛋白同时上调,土壤处理组有29个上调的蛋白在正常萌发处理组中并未上调;有17个蛋白同时下调,土壤处理组有28个下调的蛋白在正常萌发的孢子中并未下调,尤其是有5个蛋白在正常萌发的过程中上调。其中三个蛋白（XP011125916.1、XP011125917.1、XP011125918.1）属于糖基磷脂酰肌醇锚定细胞壁蛋白（GPI-anchored cell wall proteins）,还有另外一个下调蛋白 XP011126608.1（GPI-anchored phospholipase d1）,这些GPI-anchored cell wall proteins表达水平的下调可能是我们测试的土壤抑制孢子萌发的原因之一。2、通过转化酵母细胞,成功构建了AOLs00169g229、AOLs00215g160、AOL-s00075g181、AOL-s00083g51、AOLs00075g106基因的敲除载体,通过CaC12-PEG 介导的原生质体转化方法,AOLs00169g229、AOLs00075g181、AOL-s00083g51、AOLs00075g106基因都获得了阳性转化子。3、在敲除g51、g229、g181后,对菌丝的生长过程没有明显影响。这说明这几个基因编码的驱动蛋白KIP3,G蛋白α亚基以及g229基因编码的芳基醇脱氢酶AAD14对菌丝生长过程没有明显的作用。gl06基因（编码MAPK激酶PBS2）敲除后,菌丝的生长受到了严重的抑制,MAPK途径是所有真核生物重要的信号转导通路,在寡孢菌丝的生长过程中起到了非常重要的作用。4、对敲除株与野生型菌株的产孢能力进行比较,结果显示,g229基因对产孢无明显的影响,敲除株的产孢量与野生型相比较没有变化。g51与g181基因敲除后,产孢量要显著低于野生型菌株,这两个基因可能参与了寡孢节丛孢的产孢调节。5、通过对敲除株和野生型的孢子萌发率的比较,结果表明,在敲除g51、g229基因后,对孢子的萌发率没有明显的影响。g229基因敲除菌株的分生孢子对苯甲醛的抑制更敏感了,1.3 uL的苯甲醛就能抑制70%孢子的萌发,而这个浓度下野生型孢子的萌发率是93.9%,在蛋白组中发现g229编码的蛋白上调了8.52倍,说明孢子能够通过上调这个蛋白的表达水平来抵抗苯甲醛的抑制作用。敲除g106基因后,菌株完全不产孢子,而g181基因敲除后孢子萌发时间与野生型相比较提前,g7基因敲除后,孢子萌发时间与野生型相比较明显延迟,这些结果表明,氨气能通过抑制这些基因的表达水平对孢子萌发造成影响。本文的创新性:1、本研究对萌发24h、未萌发的以及土壤抑制的寡孢节丛孢的分生孢子的蛋白样品进行分析,找出各个样本中的差异蛋白,再对差异蛋白进行分类,功能注释,信号通路和代谢途径分析,在蛋白层面研究土壤抑制寡孢孢子萌发的分子机制。2、利用同源重组的方法,成功敲除基因AOLs00169g229、AOLs00075g181、AOL-s00083g51、AOLs00075g106并对突变株和野生株的表型和生理生化特征进行了较为系统的比较分析,从而初步推测这些基因可能参与的生物学功能。