【摘 要】
：
微生物木聚糖酶广泛应用于纸浆生物漂白、饲料添加剂、面团改良、及功能性低聚木糖制造等。本实验室筛选的黑曲霉A-25是一株木聚糖酶高产菌株,由它分泌的β-1,4-内切木聚糖酶的最适温度为48℃、最适pH为3.8,不利于在高温高碱的生物工程环境下使用。通过生物信息学和相关软件对本实验室的来自黑曲霉A-25木聚糖酶的三维结构进行了分子模拟后发现,该酶分子的N-端由5个氨基酸组成的残基和C-端2个氨基酸组成
论文部分内容阅读
微生物木聚糖酶广泛应用于纸浆生物漂白、饲料添加剂、面团改良、及功能性低聚木糖制造等。本实验室筛选的黑曲霉A-25是一株木聚糖酶高产菌株,由它分泌的β-1,4-内切木聚糖酶的最适温度为48℃、最适pH为3.8,不利于在高温高碱的生物工程环境下使用。通过生物信息学和相关软件对本实验室的来自黑曲霉A-25木聚糖酶的三维结构进行了分子模拟后发现,该酶分子的N-端由5个氨基酸组成的残基和C-端2个氨基酸组成的残基处于游离状态,并没有参与木聚糖酶分子二级结构的形成。为了探究游离氨基酸对木聚糖酶热稳定性的影响,本实验通过PCR技术得到分别去除两端游离氨基酸的木聚糖酶突变基因,并在大肠杆菌表达系统中高效表达,对野生型原酶和稳定性高的突变蛋白进行了纯化,对突变酶的性质进行研究。酶学性质分析发现,C-端去除两个氨基酸的突变酶——XynⅢ-2aa,最适温度为52℃,比野生型酶XynⅢ（48℃）提高了4℃,经50℃40min,52℃20min热处理后,残余酶活分别是79.4%,73.8%,而原酶分别是12.6%,2.2%,其最适反应pH没有变化。N-端去除5个氨基酸残基的突变酶XynⅢ-5aa的最适温度比原酶降低6℃,在42℃1h和45℃1h热处理后,残余酶活比原酶稍高,而最适反应pH并没有变化。本研究通过去除没有参与酶分子结构形成的游离氨基酸残基来提高木聚糖酶的最适温度和热稳定性,为木聚糖酶的分子改造提供了一个新的思路。
其他文献
目的:抗纤益心方（KYD）是临床治疗扩张型心肌病（DCM）的有效方药,前期基础研究发现本方有抑制心肌纤维化的作用,但其具体作用机制仍不明确。研究表明RhoA/ROCK1信号通路在心肌纤维化中具重要的作用,故本研究拟通过复制DCM大鼠模型及心肌成纤维细胞模型,观察KYD抑制心肌纤维化的潜在作用机制。方法:1、参照文献及前期对本病的研究方法,通过呋喃唑酮溶液构建DCM大鼠模型。造模10周后根据心脏超声
几何规划是一类特殊的非线性规划问题,是优化理论与方法研究的一个重要分支.对几何规划的研究具有广泛的应用价值,它的应用几乎涉及自然科学和社会科学的各个领域,它的发展必将推动非线性规划的迅速发展,为优化领域作出贡献.共轭梯度法是最优化理论中最常用的方法之一.它具有算法简便,存储需求小等优点,十分适合大规模优化问题.因此,选择适当的共轭梯度法以解决几何规划问题是一个值得研究的课题.本论文研究内容主要有以
研究目的:1.应用MRI定量分析髌骨不稳患者与健康者之间膝关节的骨性组织及软组织的解剖学差异,探讨髌骨不稳的MRI影像学特点以及解剖学危险因素。2.探讨髌骨不稳解剖学危险因素对应的各MRI测量指标对髌骨不稳的诊断价值,以及联合测量指标在髌骨不稳诊断中的应用价值,为髌骨不稳的正确诊断及合理治疗提供影像学依据。资料与方法:1.回顾性分析2018年10月至2019年10月在河南省洛阳正骨医院诊治的69例
目的:探讨刘爱民教授辨治慢性荨麻疹的的用药经验及学术思想,使名老中医经验能够较为全面客观的记录和传承。方法:分析来自河南省中医院2014年1月—2019年12月由刘爱民教授诊治的慢性荨麻疹患者,将符合标准的病例录入中医传承辅助系统（V2.5）,建立慢性荨麻疹病例数据库,运用频数统计、关联规则分析、改进互信息法、复杂系统熵聚类及无监督的熵层次聚类分析等数据挖掘方法,对症状、证型、治则、处方等进行分析
目的:通过对特发性膜性肾病的病理分期、实验室指标及中医证候相关特点的总结,探讨它们之间的内在联系,探索中医证候的现代病理学基础,以期为特发性膜性肾病的临床诊治提供参考。方法:通过搜集河南省中医院肾病科2012年1月-2020年1月肾穿刺明确特发性膜性肾病病理诊断的患者,根据纳入标准,纳入最终病例;并记录患者一般资料、实验室资料、病理分期、中医证候;将所收集资料应用SPSS.21软件计算。结果:1.
干旱、高盐、低温等逆境胁迫是影响植物生长发育和品质形成的主要环境因素。DREB是植物中特有的一类转录因子,在植物的逆境胁迫应答中发挥着非常重要的作用。本研究利用生物化学和分子生物学的手段从普通烟草品种K326 （Nicotiana tobaccum）中分离克隆到新的DREB转录因子基因,对其功能进行了初步探讨,有助于进一步揭示DREB家族的调控机制,为以后利用其改良烟草综合抗逆性提供了研究基础。本
目的:观察溃复康方中药保留灌肠治疗大肠湿热型溃疡性直肠炎的临床疗效,初步研究溃复康方对比锡类散的疗效差异性,以探索其临床上的应用价值。方法:本试验为随机对照试验,病例来源于2018年9月至2019年11月在河南省中医院肛肠科治疗的溃疡性直肠炎（大肠湿热型）患者,共收集符合试验标准的患者68例,并按照随机数字表法将其分为治疗组和对照组各34例,治疗组给予溃复康方,对照组给予锡类散,两组均经肛保留灌肠
目的通过观察慢性心力衰竭患者实施中西医心脏康复8E管控临床路径后运动耐量相关指标的变化,探讨心脏康复8E管控临床路径对慢性心力衰竭的临床价值,从而为中西医结合心脏康复改善运动耐量等提供依据,促进心脏康复理念的普及。方法选取我院心内科2018年11月至2019年11月住院和门诊的60例慢性心力衰竭患者为研究对象,随机分为试验组（8E管控路径组）、对照组（常规治疗组）各30例。两组患者的一般临床资料性
目的:观察调肝理脾方治疗慢性乙型肝炎肝纤维化（肝郁脾虚型）的临床疗效,为治疗本病提供有效性及安全性的循证医学证据,提供可靠的临床指导与参考方案。方法:将符合纳入标准的68例患者,随机分为治疗组和对照组各34例。治疗组给予调肝理脾方,对照组给予鳖甲煎丸,12周为1疗程。疗程结束后对两组患者治疗前后的综合疗效、中医证候疗效、肝功能、瞬时弹性成像检测值、APRI评分进行综合评价,并评估用药安全。结果:1
目的:比较黄连紫草膏联合复方多粘菌素B软膏与单纯的复方多粘菌素B软膏治疗Ⅲ期难愈性压疮的临床疗效及安全性差异,以期为今后压疮的临床治疗提供新的有效的治疗方法。方法:选取60例符合标准的Ⅲ期难愈性压疮住院患者,按照入院时间的先后依次进行编号,采用随机数字表法分为试验组和对照组,每组各30例。两组患者均予常规基础治疗,对照组:给予复方多粘菌素B软膏换药;试验组:给予黄连紫草膏+复方多粘菌素B软膏换药,