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采用60Co-γ辐射和秋水仙素诱导的方法,对直立型扁蓿豆[Melilotoides ruthenicus(L.) Sojak cv.Zhilixing]的不同器官和组织进行多倍体诱导,试图选出染色体加倍的较好条件。(1)用60Co-γ射线的5个剂量(600Gy、800Gy、1000Gy、1200Gy、1400Gy)对直立型扁蓿豆种子进行辐照。结果表明:辐照过的种子发芽率在发芽试验初期低于对照,但发芽48h之后,发芽率达95%以上;随着剂量的增加,染色体达到中期的时间逐渐推迟;在1200Gy下,染色体发生变异。(2)采用正交试验设计,探讨秋水仙素浓度、二甲基亚砜(DMSO)浓度、处理部位、处理时间和处理温度对直立型扁蓿豆多倍体诱导的效果。结果显示:在10℃条件下,对胚根长至2~3mm的发芽种子,用1%DMSO,0.1%秋水仙素处理5h,诱导染色体加倍效果较好。其中助渗剂DMSO的加入量是影响诱导效果的主要因素。(3)利用正交试验设计,通过秋水仙素处理离体培养下的各种器官,探索分析愈伤组织和分化苗的形成。首先,在MS培养基上添加不同浓度的2,4-D、6-BA和NAA,研究三种激素对愈伤组织和分化苗的影响。结果表明,直立型扁蓿豆愈伤组织诱导的较优条件是MS + 2,4-D 0.5mg/L + 6-BA 1.0mg/L + NAA 1.0mg/L。其中6-BA对愈伤组织的形成起主要作用。愈伤组织分化成苗的较优条件是MS + 6-BA 1.0mg/L。其中2,4-D对分化苗的影响是最明显的。其次,将未分化的愈伤组织接入添加不同浓度的IAA,6-BA和KT的培养基中。筛选适合分化苗形成的较好培养基。结果显示:分化苗形成的较优处理为MS + 6-BA 1.0mg/L + KT 1.5 mg/L,6-BA的加入对分化苗的形成起主要作用。进一步通过秋水仙素处理离体培养下的各种器官,研究秋水仙素浓度、DMSO浓度、处理部位和处理时间对直立型扁蓿豆分化苗的影响。结果表明,秋水仙素对离体材料诱导的较优处理条件为:以幼根为材料,0.2%秋水仙素+ 1%DMSO,处理3d。处理部位对其分化苗的形成起主要作用。