论文部分内容阅读
目的:检测白血病干细胞(Leukemia stem cells, LSCs)相关基因abcb1、bmi-1、 hoxb4在急性白血病患者骨髓中的表达,并研究探讨其在急性白血病中的临床意义,获得更好的评价临床疗效预后的指标。方法:采集2008年7月至2010年10月于天津市第一中心医院住院的41例初治急性白血病患者的骨髓、随访得到的16例缓解期患者的骨髓及10例非恶性血液病骨髓标本作对照。SYBR Green相对定量RT-PCR法检测abcb1、bmi-1、hoxb4基因在不同组的表达水平,并采用流式细胞术、染色体核型分析技术等方法综合分析LSCs相关基因与急性白血病患者年龄、FAB分型不同、缓解率、免疫表型、染色体核型异常、白细胞数量等多种疗效预后相关因素的关系。结果:1、abcb1、bmi-1、hoxb4于非恶性血液病对照组均无表达,在初治组相对表达量分别为4.26±2.26、3.72±1.91、3.74±2.38;而缓解标本组分别为2.14±1.47、2.07±0.99、1.47±0.89,均明显低于初治组(p<0.05)。初治组各亚型基因表达水平各有差异,M2、M3、B-ALL表达水平较低,M4、M5、M6、T-ALL表达水平较高,其中M3型与初治组平均水平相比差异有统计学意义(p<0.05),其它亚型差异无统计学意义(p>0.05)。2、初治组患者中正规化疗2个疗程能够获得完全/部分缓解(CR/PR)患者的基因相对表达量(分别为1.77±1.29、2.09±1.26、1.78±1.49)要明显低于未缓解(NR)的难治病例(分别为7.23±1.78、3.96±0.92、4.48±2.57)(p<0.01)3、单因素分析发现:①两个疗程内,abcb1、bmi-1、hoxb4各个基因高表达者的缓解率(分别为34.2%、47.6%、50%)均低于低表达者(分别为82.6%、85%、80.9%)(p<0.05)。(2) abcb1、bmi-1、hoxb4各个基因高表达患者的LSCs免疫表型(CD34+CD38-CD96+和CD34+CD38-CD123+)表达阳性的比例(分别为55.6%、52.4%、50%)均高于低表达患者(分别为17.4%、15%、19%)(p<0.05)。③bcb1、bmi-1、hoxb4各个基因高表达患者出现高白细胞(≥30×109/L)的几率(分别为61.1%、57.1%、55%)均高于低表达患者(分别为21.7%、20%、23.8%)(p<0.05)4、多因素分析:abcb1、bmi-1、hoxb4基因中有两种及以上高表达的患者划分为LSCs相关基因高表达组,只有一种基因高表达或均无高表达患者划分为低表达组。综合多指标分析LSCs相关基因的表达,上述变化的p值均小于单因素分析p值,差异更显著(p<0.01)①两疗程正规化疗后,LSCs相关基因高表达组缓解率低于低表达组(35.3%:87.5%)(p<0.01)。②LSCs相关基因高表达组LSCs免疫表型(CD34+CD38-CD96+和CD34+CD38-CD123+)阳性率高于低表达组(58.8%:16.7%)(p<0.01)③LSCs相关基因高表达组出现高白细胞比例高于低表达组(58.8%:25%)(p<0.01)结论:LSCs相关基因(abcb1、bmi-1、hoxb4)表达在急性白血病患者发病初期表达增高,缓解后表达水平明显下降;并与LSCs免疫表型呈相关性,表达高者易出现高白细胞,化疗效果差,缓解率低,与多种预后不良因素相关;综合多指标分析可更好的作为临床评估疗效和预后的指标。