无性产孢是丝状真菌主要的繁殖方式,也是病原真菌传播的基础,真菌无性孢子的产生也受内在分子机制的调控。真菌无性产孢分子机制的阐明,对有益真菌的利用及有害真菌的防控都具有重要的意义。粗糙脉孢菌容易培养,生长速度快,不易被污染,基因注释信息非常详细,70%的基因都具有敲除突变体,具有丝状真菌覆盖率最大的突变体库,是用作研究丝状真菌无性产孢非常好的模式材料。为了全面解析ADA-6所调控的基因,我们首先采用RNA-seq技术,比较了野生菌株在产孢诱导前后全基因组范围的差异表达谱(诱导前0h,诱导12h,诱导24h),对诱导前后差异表达基因的聚类分析发现,无性产孢诱导主要影响氧化还原过程与代谢过程,与ROS(reactive oxygen species)相关的基因差异表达明显,无性产孢诱导阶段伴随ROS的升高。同时,与产孢相关的基因(包括调控基因和结构基因)出现特异性表达。为揭示其它诱导表达基因在无性产孢中的功能,我们对这些基因的突变体的无性产孢表型进行了分析,新发现6个正向影响无性产孢的基因(NCU09792、NCU05159、NCU06112、NCU05079、NCU00461、NCU07521(fwd-2))。这6个基因在无性产孢过程中增量表达,相应的基因突变体无性产孢量与野生菌株相比有明显降低,说明它们对无性产孢具有正调控作用。其次,我们比较了野生型菌株和ada-6突变株在无性产孢诱导前后转录表达谱,差异表达基因的聚类分析发现差异表达基因主要涉及氧化还原过程,有机酸、羧酸、氨基酸跨膜运输过程,细胞壁组织和膜改性,分子功能上主要是氧化还原酶活性和水解酶活性。与产孢相关的fl和eas基因,在突变株中的表达量明显低于野生型菌株的水平,转录因子ADA-6正调控fl基因和eas基因。poi-2和nop-1是之前报道过与产孢相关的基因,RNA-seq和qrt-pcr结果显示ada-6正向调控调控poi-2和nop-1。参与氧化还原过程的酶编码基因NCU04865、NCU09209、NCU08755、NCU08856,突变株表型与野生型菌株相似,但在突变株中的表达量明显低于野生型菌株的水平,说明ada-6可能和其它转录因子共同调控这些基因。我们的结果进一步加深了我们对粗糙脉孢菌无性产孢发育及其调控网络的认识,对丝状真菌无性产孢及其调控的认识有一定借鉴意义。