嗜肺军团菌mip基因DNA疫苗初步研究

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军团病是由军团菌属感染所致的呼吸道传染病,人类若吸入含有嗜肺军团菌的气溶胶而感染,可引起以非典型性肺炎和Pontiac热为主的疾病,若治疗不当,病死率极高,老年人和免疫抑制者最为易感。研究发现:军团菌广泛存在于土壤、天然水以及人类生活用水领域如空调系统冷却塔水、淋浴头水、井水以及自来水等。随着空调、加湿器在现代生活中的普及,军团菌感染会大量增加,危害会更严重。我国已将军团病列为需要重点防治的一种新发传染病,但目前尚无理想的预防措施。本研究选择了嗜肺军团菌DNA疫苗这一研究领域,在查阅国内外大量文献的基础上,选择嗜肺军团菌mip基因作为候选疫苗基因,并首次设计将mip基因与佐剂分子CTB联合使用。希望能为研制安全、有效的军团菌疫苗提供科学依据和研究基础。 本研究共分为四部分进行: 第一部分,以嗜肺军团菌L1株和霍乱弧菌569B株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得了嗜肺军团菌828bp的mip基因和霍乱弧菌376bp的ctxB基因。将mip基因和ctxB基因定向克隆入原核表达载体pUC18,构建原核表达重组质粒pLpmip和pctxB,诱导pLpmip和pctxB在原核系统中分别表达出24kDa和11kDa的蛋白。 第二部分,将mip基因和ctxB基因定向克隆入真核表达载体
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