生物表面活性剂是指微生物在特定生长条件下分泌的一些可降低水表面张力的代谢产物，包括糖脂类、脂肽类等。甘露糖赤藓糖醇脂(简称MELs)属于糖脂类生物表面活性剂，具有良好的界面性能、优良的生物安全性、可生物降解，此外MELs还具有抗菌、抗肿瘤及抗氧化等多种生物活性，应用范围和前景十分广阔。　　目前，对Pseudozyma属真菌的研究主要集中于生防及代谢产物两大类。MELs作为Pseudozyma属真菌的重要代谢产物，研究主要集中于发酵条件优化、MELs类似物的化学结构解析等方面，但其生物学活性，如抗菌活性等仍有待研究。在前期研究中已分离鉴定了一株类酵母菌Pseudozyma aphidis，命名为CNm2012，是桑白粉病的潜在生防菌。本论文主要研究了Pseudozyma aphidisCNm2012的代谢产物MELs的抗细菌、抗真菌活性;探讨碳氮源对其发酵产物抗菌活性的影响，为该菌株的进一步应用开发提供了重要参考。　　(1)选用土豆液体培养基、萨氏液体培养基和含有油类的特殊培养基发酵P.aphidis CNm2012，离心去除菌体沉淀，乙酸乙酯萃取发酵上清液，得到萃取物。选取大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）三种条件致病细菌和球孢白僵菌（Beauveriabassiana）、拟茎点霉（Phomopsis sp.）、青霉菌（Penicillium sp.）三种病原真菌作为受试菌，检测不同发酵培养基下乙酸乙酯萃取物的抗菌活性。结果显示，采用土豆培养基、萨氏培养基发酵时，P.aphidis CNm2012的萃取物不具有抗菌活性，相反，在以油类为唯一碳源的培养基发酵时，其萃取物具有较强的抗菌能力，可显著抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，并对昆虫病原真菌球孢白僵菌表现出了较强的抑制作用。　　(2)通过液滴崩溃法和排油圈法定性分析以油类为唯一碳源的培养基发酵时P.aphidis CNm2012的代谢产物对发酵上清液的表面活性作用。取50 ul发酵上清液置于疏水介质表面，以新制液体培养基为阴性对照，以吐温培养基混合液为阳性对照，判断P.aphidis CNm2012发酵上清中是否具有表面活性成分。结果显示，在疏水介质表面，新鲜培养基直径约为5mm，发酵上清液的直径与吐温培养基混合液相似，达到9 mm左右，表明发酵上清液中含有生物表面活性剂。P.aphidisCNm2012发酵上清液可剧烈破坏脂质膜，使液体石蜡表面的油膜出现明显的排油圈，表明其表面活性作用较强。进一步采用LC-MS和GC-MS分析以油类为唯一碳源的发酵萃取物，按照已知的MEL结构对分子离子及离子碎片进行推导，证实了萃取物中所含的表面活性剂为MEL，且萃取物中可能包括4种类型的MEL(MEL-A, MEL-B, MEL-C, MEL-D)。　　(3)以氯仿∶甲醇∶氨水(65∶15∶2，v/v/v)为展开剂进行薄层层析分析萃取物的主要组分。结果显示菌株CNm2012发酵培养基的乙酸乙酯萃取物中主要包含5个含量相对较高的组分，Rf值分别为0.98，0.85，0.73，0.67，0.47，进一步采用柱层析分离纯化萃取物，得到分别包含几个组分的3个样品，并进行薄层层析验证。将3个样品进行抗菌活性检测，结果显示仅样品3具有抗菌活性。LC-MS分析显示样品3分子量为780.4，GC-MS分析显示样品3的脂肪酸侧链主要为十六烷酸(n-Hexadecanoic acid)和9，12十八碳二烯酸（9，12-Octadecadienoic acid），综合判断该样品可能为MEL-D。发现MEL-D不仅可抗革兰氏阳性菌，对革兰氏阴性菌和真菌也具有抑制作用。对MEL-D进行抗菌效果分析，发现MEL-D的抑菌率随处理温度的增加及处理时间的延长均呈下降趋势，其对细菌的抗菌效果强于真菌。　　(4)据报道，Pseudozyma属真菌在不同培养条件代谢产物差异较大。通过单因素实验法分析了碳氮源对P.aphidis CNm2012发酵产物抗菌活性的影响，发现碳源对其影响较大，其中麸皮优于大豆油，其作为主要碳源时抑菌活性得到显著提高，对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径可达到48.3 mm。