论文部分内容阅读
目的：研究药对防风、乌梅配伍在体外对肥大细胞蛋白酶激活受体表达以及相关介质分泌，其信号通路的影响，探索该药对抗过敏机制，提供药对配伍的科学依据，为下一步研究提供依据。 方法：在体外采用胰蛋白酶刺激小鼠肥大细胞株P815建立肥大细胞脱颗粒模型，通过MTT、RT-PCR、Western blotting方法、ELISA等观察防风、乌梅配伍对肥大细胞细胞毒性和蛋白酶激活受体表达的影响；防风、乌梅配伍对P815细胞分泌组胺和Th2类细胞因子影响；防风、乌梅配伍对肥大细胞分泌细胞因子相关信号传导通路的影响。 结果： 1、防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对P815细胞的细胞毒作用，乌梅最强，防风次之，乌梅和防风配伍最弱。 2、防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物均可降低胰蛋白酶刺激的P815细胞中PAR-2mRNA和蛋白表达（P<0.05或P<0.01），抑制强度依次为防风和乌梅配伍组、乌梅组、防风组，且呈现出浓度依赖性。 3、防风、乌梅、防风乌梅配伍提取物均对胰蛋白酶刺激的P815细胞有明显的抑制组胺的分泌的作用（P<0.05或P<0.01）；乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞分泌IL-4有明显的影响抑制作用（P<0.05或P<0.01）；抑制分泌组胺和IL-4作用防风和乌梅配伍提取物尤为明显；防风、乌梅和防风乌梅配伍提取物均对IL-13无抑制作用(P＞0.05)。 4、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞AKT有明显的抑制作用（P<0.05）；防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞ERK有明显的抑制作用（P<0.05或P<0.01），同时，防风和乌梅配伍提取物表现相对于其他组抑制作用明显。 结论： 1、防风、乌梅、防风和乌梅的配伍在体外抑制肥大细胞表面PAR-2表达；抑制分泌Th2细胞因子IL-4，其信号通路可能与AKT、ERK信号途径有关。 2、防风、乌梅、防风和乌梅的配伍可抑制肥大细胞脱颗粒，其机制可能与阻断肥大细胞脱颗粒自身放大信号中关键分子PAR-2、IL-4、HA等有关。 3、防风和乌梅配伍减轻药物对细胞的毒性作用，并可增大抑制肥大细胞PAR-2表达、分泌组胺和IL-4，提示防风和乌梅配伍具有“减毒增效”作用。