人类分泌蛋白基因的克隆表达与功能初探

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaiyiyang9708
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本文对由大规模电子信号肽捕捉筛选(ESST)得到的其中两个分泌蛋白进行了初步的研究.人类分泌蛋白基因hMGRAP(Human Multiple Glutamine Repeat Acidic Protein),定位于染色体7q22.1,全长cDNA为1547bp,编码含有248个氨基酸的蛋白,该蛋白富含重复的谷氨酸序列,等电点为4.6.用PCR方法从正常人的混合cDNA文库中克隆到hMGRAP.Western blot实验表明hMGRAP能大量地从瞬时转染的cos-7细胞中分泌到细胞培养液中.RT-PCR结果显示,hMGRAP相对表达较高的组织为睾丸、骨骼肌和肾.总之,筛选并克隆到一个新的人类分泌蛋白基因hMGRAP,其生物学功能可能因其重复的谷氨酸编码序列而具有一定特殊性.OLFML1(Olfcatomedin like 1)则含402个氨基酸,是OLF家族的一个新成员,具有OLF DOMAIN.它在黑猩猩、小鼠、大鼠等生物中都有同源蛋白.Western印迹和免疫细胞化学表明人OLFML1通过穿高尔基体网络被分泌到细胞外.OLFML1的组织分布较为广泛,另外人源OLFML1在各组织中都有三种mRNA转录本.此外利用GST原核表达系统,得到大量OLFML1蛋白,免疫家兔,得到该蛋白的多克隆抗体,并纯化抗体,用抗体检测到OLFML1存在于人血清中.
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