【摘 要】
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首次将新城疫病毒(NDV)主要宿主保护性抗原HN和F蛋白展示在T4噬菌体表面,并研究了重组噬菌体T4-Z1-HN和T4-Z1-F的免疫原性.用RT-PCR方法从6个NDV广东分离株(GD/2/00、GD/3/01
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首次将新城疫病毒(NDV)主要宿主保护性抗原HN和F蛋白展示在T4噬菌体表面,并研究了重组噬菌体T4-Z1-HN和T4-Z1-F的免疫原性.用RT-PCR方法从6个NDV广东分离株(GD/2/00、GD/3/01、GD/4/01、GD/6/01、GD/9/02、GD/10/02)扩增到HN基因cDNA片段,并将其分别克隆到pGEM-T easy载体中.序列分析表明,6个NDV分离株的HN基因cDNA长度均为1704bp,编码568个氨基酸.6个NDV分离株彼此间核苷酸序列同源性为96.0-100%,氨基酸同源性为97.0-100%;与基因Ⅶ型毒株之间的氨基酸同源性达到95.6-98.8%,但与其它基因型毒株之间的同源性较低,介于80.1-91.0%之间.除GD/2/00外,其它5个NDV分离株HN蛋白中都含有保守的119、341、433、481、508位糖基化位点,538位的糖基化位点缺失,GD/2/00同时缺失508位的糖基化位点,推测不同NDV毒株HN蛋白有不同的糖基化修饰方式和空间构象.位于74-110位氨基酸的七肽重复序列(Heptad RepeatDomain,HR区)、病毒受体结合位点(234NRKSCS239)以及位于HN蛋白球状头部的与其寡聚体形成有关的序列(399GAEGR403)是所有NDV毒株HN蛋白中高度保守的区域.该研究已将NDV主要宿主保护性抗原成功展示在T4噬菌体表面,重组噬菌体具有良好的抗原性与免疫原性,可以诱导特异性NDV抗体产生,并提供NDV强毒攻击的免疫保护,同时接种重组噬菌体T4-Z1-HN和T4-Z1-F可显著加强NDV攻击的免疫保护作用.该研究结果为研制安全、高效、廉价的NDV基因工程疫苗奠定了良好的基础.
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