本研究以未成熟香蕉雄花为外植体，通过诱导愈伤组织作为香蕉遗传转化的受体材料。将含有乙肝表面抗原(HBsAg)基因的植物表达载体pHBS1301(含GUS基因)，通过农杆菌介导的方法转入香蕉。 外植体褐化成为单子叶植物和木本植物再生体系建立时一个倍受关注的问题(Khatrieta1.，1997)。香蕉在进行遗传转化过程中，外植体容易褐化，从而降低了再生频率，影响到遗传转化的效率。为降低香蕉转化过程中外植体的褐化率，我们采用香蕉(MusaAAAgroupcv.Brazilian)未成熟雄花作为外植体，以农杆菌介导法进行遗传转化。通过调整培养基中铵态氮与硝态氮的比例，来抑制外植体褐化。结果表明，当改良的MS培养基中铵态氮与硝态氮(NH+/NO-3)的摩尔比为20.6:67.6时，具有较强的抗褐化能力。当6-BA浓度为1.0mg/L时，外植体易于诱导出胚状体。 通过根癌农杆菌侵染香蕉愈伤组织外植体，以GUS瞬时表达效率为指标，系统研究了浸染时间、共培养条件、AS浓度、筛选条件等对转化率的影响的基础上建立、优化了以香蕉未成熟雄花为材料的香蕉遗传转化体系。结果表明活化后农杆菌稀释后浓度为OD6000.2，侵染15min；农杆菌侵染后暗光下共培养5d；在共培养基中加入120umol/L的AS，可明显提高GUS瞬时表达率。共培养后的外植体，经过脱菌培养，再经过约6-8个月的时间诱导胚状体及侧芽，接着生根培养通过潮霉素加压筛选。以适合香蕉生根的选择压，选择10mg/L的潮霉素浓度作为转基因植株生根选择压力。得到转p1301HBS的香蕉株系，经提取转化香蕉植株叶片的总DNA进行PCR验证，初步证明目的基因已整合到香蕉的基因组中。ELISA检测结果表明在转基因香蕉叶片中表达的HBsAg具有免疫活性，测得其平均表达量为25ng/g鲜重。 以巴西香蕉(MusaAAAgroupcv.Brazilian)和皇帝蕉(MusaparadisiacalAA)胚性愈伤组织为材料，对影响其原生质体产率和活力的因素进行了研究。结果表明：对诱导巴西蕉及皇帝蕉胚性愈伤进行原生质体分离，分别用CPW+13％甘露醇+1.6％纤维素酶+0.9％果胶酶酶解液处理巴西蕉愈伤组织12小时，用CPW+11％甘露醇+1.8％纤维素酶+1.0％果胶酶酶解液处理皇帝蕉愈伤组织12小时。巴西蕉产率最高达2.56×107个/ml，活力达61.5％；皇帝蕉产率达2.64×107个/ml，活力达63.4％。为香蕉体细胞杂交育种奠定了基础。