目的:探求并在血清和细胞水平验证婴幼儿血管瘤血清特异性microRNA。方法:1.以非血管瘤患儿血清为对照,应用TaqMan探针法对婴幼儿血管瘤初期筛选的血清差异表达miRNA:hsa-miR-518a-3p、hsa-miR-518e、hsa-miR-519a、hsa-miR-512-3p、hsa-miR-216b、hsa-miR-544,进行大样本血清验证,并应用原位杂交技术在婴幼儿血管瘤组织中再次验证。2.取得婴幼儿血管瘤手术标本后,通过胶原酶消化,收集到的细胞经CD133免疫磁珠分离纯化,获得人类来源的CD133阳性血管瘤干细胞。获得的血管瘤干细胞经细胞表面标记CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105以及CD144流式检测,成脂、成骨诱导分化试验,Matrigel基质胶成管实验,以及裸鼠皮下成瘤试验,对分选出的血管瘤干细胞进行鉴定。3.以FAM标记的miR-518a-3p mimics、miR-518a-3p inhibitor以及miR-518a-3p mimics NC、miR-518a-3p inhibitor NC分别转染血管瘤干细胞后,倒置荧光纤维镜观察并分析转染效率;用SYBR Green法对各转染组血管瘤干细胞内miR-518a-3p的表达水平进行检测;利用CCK-8法检测miR-518a-3p对血管瘤干细胞增殖能力的影响;通过Annexin V/7-AAD双染法检测miR-518a-3p对血管瘤干细胞凋亡能力的影响;通过PI染色法检测miR-518a-3p对血管瘤干细胞细胞周期的影响。结果:1.miR-518a-3p和miR-518e在血管瘤患儿血清中差异较大,Fold change分别为276.740(P<0.001)和1889.889(P<0.001),具有一定特异性,miR-518a-3p较miR-518e在血管瘤组血清中表达量更高;miR-518a-3p在增殖期婴幼儿血管瘤组织的部分血管内皮中有阳性表达,而消退期未见。2.CD133+血管瘤干细胞表达CD29(99.5%)、CD44(97.9%)、CD90(87.6%)和CD105(98.5%),几乎不表达CD31(0.2%)、CD34(0.1%)、CD45(0.1%)和CD144(0.1%)。血管瘤干细胞在体外可形成网状类似血管壁的结构,并可被诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞;接种于裸鼠皮下可形成类似婴幼儿血管瘤的病灶。3.血管瘤干细胞转染miR-518a-3p mimics后的增殖活性稍增强,而转染miR-518a-3p inhibitors后的增殖活性稍减弱。血管瘤干细胞miR-518a-3p mimics转染组S期细胞比例上升,G2/M期细胞比例下降,但比例差异并不明显。血管瘤干细胞miR-518a-3p mimics转染组,凋亡比例下降;miR-518a-3p inhibitors转染组凋亡比例升高。结论:血清miR-518a-3p和miR-518e具有用于血管瘤的早期鉴别诊断的潜能。miR-518a-3p mimics可显著上调血管瘤干细胞内miR-518a-3p的表达,其表达上调后可促进血管瘤干细胞的增殖,上调S期细胞比例,并抑制血管瘤干细胞凋亡。