紫色马铃薯“紫云1号”离体培养及试管薯诱导的研究

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本试验采用植物组织培养技术,以“紫云1号”为试验材料,先从芽外植体消毒灭菌以及不同培养温度两个方面探讨这两个因子对“紫云1号”马铃薯芽诱导的影响,接着选用健壮的无菌苗作为外植体材料,研究了无菌芽的继代增殖、愈伤组织的诱导和分化、试管薯的诱导以及试管苗的生根壮苗等各阶段最适宜的培养基配方及培养条件。试验结果表明:1、“紫云1号”马铃薯芽外植体灭菌以双因子灭菌处理效果优于单因子灭菌处理,最适宜的灭菌组合为:0.14%HgCl214min+13%NaClO10min,芽外植体的污染率为24.44%,芽诱导成活率为68.89%;最适宜的芽外植体诱导培养温度是26℃,芽外植体的污染率为37.78%,诱导成活率为55.56%。2、MS基本培养基比其他基本培养基更有利于“紫云1号”马铃薯的无菌芽继代增殖,增殖倍数为4.00倍。3、“紫云1号”马铃薯无菌芽继代增殖最适宜的生长素是IBA,最佳激素组合是:6-BA3.0mg/L+IBA0.3mg/L,增殖倍数为5.30倍;在无菌芽继代增殖中添加TDZ0.5mg/L有利于芽的分化增殖,增殖倍数为6.38倍。4、叶柄是“紫云1号”马铃薯愈伤组织诱导的最佳部位,2,4-D相对于6-BA更适合用于“紫云1号”马铃薯的愈伤组织诱导,出愈率为100.00%,愈伤组织呈淡黄色颗粒状。5、“紫云1号”马铃薯愈伤组织分化出芽的最佳分化培养基是:MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA33.0mg/L,叶柄芽分化率为92.80%。6、6-BA是“紫云1号”马铃薯无菌苗试管薯的诱导中必不可少的激素,最适宜的6-BA浓度是1.0mg/L。7、添加10mg/L香豆素可以提高“紫云1号”马铃薯无菌苗试管薯的形成,结薯率为64.44%,平均每株结薯个数为1.62个,单薯重为0.028g。8、蔗糖浓度对“紫云1号”马铃薯无菌苗试管薯的形成和发育有极大的影响。以45g/L蔗糖用量对试管薯的诱导效果最理想。结薯率、平均每株结薯个数和单薯重分别为78.33%、1.63个和0.052g。9、在同一试管薯的诱导培养基中,无菌苗茎段基部比茎段中部和茎段顶部更有利于无菌苗试管薯的诱导。10、培养温度为22℃时,对“紫云1号”马铃薯无菌苗试管薯的诱导效果最好,结薯率为79.56%,平均每株结薯个数为1.70个,单薯重为0.052g。11、IBA是“紫云1号”马铃薯试管苗生根诱导的最适宜生长素,6-BA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.4mg/L激素组合对“紫云1号”马铃薯试管苗生根诱导的效果最好。生根率为100.00%、平均每株生根数为4.64条,平均根粗为3.86mm,平均根长和平均株高分别为3.47cm和6.57cm。12、植物生长抑制剂PP333对“紫云1号”马铃薯试管苗生根诱导有促进作用,最适宜的使用浓度是0.3mg/L。生根率为100.00%,平均每株生根数为4.95条,平均根粗为3.92mm,平均根长为2.63cm,平均株高为5.80cm。
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