柚皮苷调控人卵巢癌SKOV3细胞COX-2的表达

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目的:研究中药柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖的影响及其对COX-2表达的调控,初步探讨柚皮苷的抗肿瘤作用。方法::常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组(柚皮苷0μmol/L)、柚皮苷10μmol/L组、柚皮苷20μmol/L组、柚皮苷40μmol/L组、阳性对照组(塞来昔布80μmol/L)。1、MTT法测定柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。2、通过Real-time PCR测定药物干预48h后各浓度组细胞中COX-2mRNA表达水平的变化。3、采用Western Blot法测定药物干预48h后各浓度组细胞中COX-2蛋白的表达。结果:1、MTT检测法显示,柚皮苷能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞生长,并随着时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显。柚皮苷各浓度组(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)对卵巢癌细胞的24h生长抑制率分别为35.78%、59.63%、76.15%;48h生长抑制率分别为45.36%、67.12%、85.50%;72h生长抑制率分别为47.09%、75.87%、90.32%,与空白对照组相比有明显差异(P<0.05)。2、不同浓度柚皮苷作用细胞48h后,Real-time PCR结果显示,与空白对照组(1.094±0.053)比较,10μmol/L、20μmol/L柚皮苷即对SKOV3细胞COX-2mRNA表达有影响(0.828±0.006,0.753±0.011,P<0.05),而40μmol/L柚皮苷组及塞来昔布组则明显下调COX-2mRNA的表达(0.412±0.216,0.321±0.017,P <0.01)。3、不同浓度柚皮苷作用细胞48h后,Western Blot法检测结果示,与空白对照组(1.7325±0.0826)相比,10μmol/L柚皮苷组相对表达量(1.7925±0.0880)虽略有上调,但无统计学意义,浓度20μmol/L组、浓度40μmol/L组及塞来昔布组均可明显降低SKOV3细胞COX-2蛋白的表达水平(1.2225±0.0822,1.2725±0.07632,0.3075±0.0977,P <0.05)。结论:柚皮苷明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖,下调人卵巢癌SKOV3细胞中COX-2mRNA及蛋白的表达并可能通过下调COX-2的表达从而达到抗肿瘤作用,为柚皮苷运用于临床治疗卵巢癌提供实验依据。
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