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目的:研究在双侧卵巢切除并补充雌激素(ovariectomized,estrogen primed,OEP)的小鼠侧脑室注射瘦素(leptin)后,神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)Y1受体免疫阳性细胞,Y1受体(NPY Y1R)蛋白以及血清中卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)的变化,探讨leptin调控生殖的可能机理,为leptin的临床用药提供一定的实验依据。 方法:选用清洁级成年雌性C57BL/6J小鼠60只,制备OEP模型:在无菌条件下行双侧卵巢切除术,术后第11天开始每天皮下注射苯甲雌二醇(Estradiol Benzoate,E2)2μg/只,连续注射10天。OEP模型完成后将小鼠随机分成实验组和对照组,定位侧脑室,实验组注射含4μg leptin的生理盐水2μl,对照组注射同体积生理盐水,每组又分别按注射后1.0h,1.5h,2.0h,2.5h分为4个组。 1.将上述2.5h实验组和对照组小鼠经左心室穿刺进入主动脉,刺破右心耳,用生理盐水冲洗,4%多聚甲醛快速灌注,以视交叉和乳头体后缘的冠状切面为界取脑组织,常规冰冻切片,免疫组织化学方法观察NPY Y1R免疫阳性细胞在小鼠下丘脑的分布和变化。 2.将各时间段实验组和对照组小鼠摘除眼球取血,离心后取上层血清,用放射免疫法(Radio-immunity analysis,