姜黄素抗动脉粥样硬化的分子机制

来源 :内蒙古医学院 内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pengtao2222
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目的本课题通过提纯大鼠肝微粒体中β-羟基-β-甲基戊二酸辅酶A还原酶(HMG-CoAreductase),氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导培养的人脐静脉内皮细胞(HCAECs)和建立高脂饮食兔动脉粥样硬化模型。应用细胞生物学技术探讨姜黄素(curcumin)在体外对纯化的β-羟基-β-甲基戊二酸辅酶A还原酶作用,对氧化低密度脂蛋白的诱导的人脐静脉内皮细胞(HCAECs)和兔动脉硬化模型主动脉上表达的植物血凝素样受体(Lox-1)抑制作用机制,探究其作用环节(药物靶点),为姜黄素的进一步开发利用奠定基础。方法制备两种大鼠肝的微粒体—冻融提取—硫酸铵沉淀—热处理—硫酸铵沉淀—生物性凝胶柱层析—CoA亲和层析柱层析制备了纯化了的HMG-CoAreductase,通过紫外分光光度法测定酶活性,以普伐他丁为阳性药物对照,利用米氏方程(Michaelis-Menten)的双倒数作图法(Lineweaver-Burk)建立测定酶竞争性抑制剂的方法。建立氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理的人脐静脉内皮细胞(HCAECs)模型,以氯沙坦为阳性药物对照,利用RT-PCR法,测定不同浓度姜黄素对模型的人脐静脉内皮细胞上Lox-1表达的影响,分析起作用靶点和作用方式,并比较了姜黄素对正常和高脂饮食建立兔动脉粥样硬化模型的体重、血液生化指标、主动脉硬化斑块、Lox-1mRNA表达的影响。结果姜黄素对β-羟基-β-甲基戊二酸辅酶A还原酶无影响,姜黄素在传代人脐静脉内皮细胞细实验中可有效抑制氧化型低密度脂蛋白诱导引起的细胞Lox-1mRNA表达的上调(P<0.01),并且具有剂量依赖性。对正常的新西兰白兔无作用,对高脂饮食建立兔动脉粥样硬化模型的体重、血液生化指标、主动脉斑块、Lox-1mRNA均有明显的治疗作用(P<0.01)。结论姜黄素是安全有效的治疗动脉粥样硬化药物,其机理是通过抑制植物血凝素样受体(Lox-1)mRNA表达发挥作用。
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