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目的 顺铂（Cisplatin）是一种效果显著的含铂类抗癌药物,是临床上使用最普遍的金属基化疗药物之一,常用于肺癌、卵巢癌等实体瘤的治疗。顺铂治疗的常见副作用之一是急性肾损伤（AKI）,发病机制尚未阐明且缺乏有效干预措施。最新的研究发现,c GAS-STING信号通路在调控炎症性疾病中发挥关键作用,可能是调控AKI的潜在靶点。杨梅素（Myricetin,Myr）具有优异的生物活性,如抗炎,抗氧化等,提示其在防治AKI中的潜力。然而,杨梅素在水溶液中的溶解度低,口服生物利用度差,限制了其进一步研究,通过药物递送系统有望改善杨梅素的口服应用。据此,本课题通过构建负载杨梅素的纳米药物,研究其在治疗顺铂诱导的AKI中的作用,并探索其通过调控c GAS-STING信号通路治疗AKI的作用机制。本课题的开展,有望为改善AKI提供新的治疗方案,具有重要研究价值和潜在临床意义。方法1、采用薄膜水化法构建HS15-杨梅素纳米胶束（HS15-Myr）,进行表征分析并筛选最优处方比;考察其储存稳定性,测定其体外抗氧化活性和药物释放,并研究其在细胞内的摄取和定位。采用顺铂构建人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2）急性肾损伤体外细胞模型,检测HS15-Myr的体外肾保护作用;检测HS15-Myr对活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）的影响;免疫荧光及Western Blot法检测HS15-Myr对顺铂诱导DNA损伤和c GAS-STING信号通路的影响。构建顺铂诱导的小鼠AKI模型,口服给予HS15-Myr,通过小鼠体重、肾组织H＆E染色、血清尿素氮（BUN）和肌酐（SCr）等评价HS15-Myr的体内肾保护作用;检测HS15-Myr对肾组织相关抗氧化酶如SOD、GSH等的影响;ELISA法检测HS15-Myr对肾组织炎症因子IL-1β、TNF-α的影响;免疫组化法检测HS15-Myr在小鼠体内对DNA损伤-c GAS-STING信号通路的影响。2、以瑞鲍迪苷A（RA）为载体构建负载杨梅素的纳米胶束（RA-Myr）,进行表征分析并确定最优处方比;考察其储存稳定性,测定其体外抗氧化活性和药物释放,并研究其在细胞内的摄取和定位。采用顺铂构建HK-2细胞急性肾损伤体外细胞模型,检测RA-Myr体外肾保护作用;检测RA-Myr对活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）的影响;免疫荧光法检测RA-Myr对顺铂诱导DNA损伤和c GAS-STING信号通路的影响。通过添加c GAS抑制剂RU.521,评价RA-Myr联合RU.521对HK-2细胞增殖、ROS积累和MMP的影响,并检测RA-Myr联合RU.521治疗对DNA损伤-c GAS-STING信号通路的影响,明确RA-Myr体外通过调控c GAS-STING信号通路发挥肾保护作用的机制。构建顺铂诱导的小鼠AKI模型,口服给予RA-Myr,通过小鼠体重、肾组织H＆E染色、血清尿素氮（BUN）和肌酐（SCr）等评价RA-Myr体内肾保护作用;采用RT-PCR检测RA-Myr对肾组织相关抗氧化酶SOD、NQO1、HO-1以及相关炎症因子如TNF-α、IL-1β、IL-6的影响;RT-PCR及免疫组化法检测RA-Myr在小鼠体内对DNA损伤-c GAS-STING信号通路的影响。结果1、本课题所制备的HS15-Myr包封率高,其胶束粒径为12.76±5.8 nm,多分散性指数（PDI）为0.062±0.005,Zeta电位为-7.31±9.0 m V;并具有优异的储存稳定性;体外抗氧化结果显示HS15-Myr提高了Myr的体外抗氧化活性;HS15-Myr显著提高了Myr的溶解度和细胞摄取。体外肾保护作用结果显示,HS15-Myr可减轻顺铂诱导的HK-2细胞死亡、ROS积累和MMP下降;体外作用机制结果显示HS15-Myr抑制了顺铂诱导的DNA损伤和c GAS-STING信号通路的活化。体内结果显示,HS15-Myr缓解了顺铂诱导的小鼠AKI症状,如体重减轻,肾组织病理学损伤,BUN和SCr水平升高等,体现出肾保护潜力（P＜0.05）;进一步作用机制研究证明HS15-Myr抑制顺铂诱导的相关抗氧化酶和炎症因子水平变化,并抑制顺铂诱导的DNA损伤-c GAS-STING信号通路的活化（P＜0.05）。2、本课题所制备的RA-Myr包封率高,其胶束粒径为112.55±0.25 nm,多分散性指数（PDI）为0.290±0.004,Zeta电位为13.92±1.06 m V;并具有良好的储存稳定性;体外抗氧化结果显示RA-Myr提高了Myr的体外抗氧化活性;RA-Myr显著提高了Myr的细胞摄取。体外肾保护作用结果显示,RA-Myr可减轻顺铂诱导的HK-2细胞死亡、ROS积累和MMP下降;体外作用机制结果显示RA-Myr抑制了顺铂诱导的DNA损伤和c GAS-STING信号通路的活化。RA-Myr联合RU.521能进一步减轻顺铂诱导的HK-2细胞死亡、ROS积累和MMP下降,并且进一步抑制了顺铂诱导的DNA损伤和c GAS-STING信号通路的活化。体内结果显示,RA-Myr缓解了顺铂诱导的小鼠体重减轻,肾指数升高,肾组织病理学损伤,血清BUN和SCr水平升高等AKI症状,发挥良好的肾保护作用（P＜0.05）;体内作用机制研究证明RA-Myr增强AKI小鼠肾组织相关抗氧化酶活性,减轻肾脏炎症,并抑制顺铂诱导的DNA损伤-c GAS-STING信号通路的活化（P＜0.05）。结论杨梅素纳米胶束提高了杨梅素在体内外对顺铂诱导的AKI的治疗作用,作用机制可能跟抑制DNA损伤-c GAS-STING信号通路有关。