麦麸是小麦制粉过程中的副产物,由于其不佳的口感和风味以及对面粉储藏品质的不良影响,常被用作饲料和酿造原料,综合利用价值常被忽略。近年来的研究表明,谷物皮层中存在的天然活性物质具有较强的抗氧化活性。多酚是麸皮中的主要活性物质,本研究主要从麦麸中提取分离多酚化合物,并研究其体外抗氧化活性和在降低H2O2诱导Caco-2细胞氧化损伤方面的效果。主要研究结果如下:1.纤维素酶促提取麦麸多酚的工艺优化:采用响应面法对提取工艺进行优化,确定了最佳提取工艺:纤维素酶用量765.9 U/g,液料比20.6:1 m L/g,酶解时间18.9 h;此条件下麦麸多酚得率的理论预测值为4024.44μg GA/g DW,实际得率为4053.84±13.26μg GA/g DW。2.麦麸多酚提取方法的选择及提取物的鉴定:对纤维素酶促提取、超声辅助乙醇提取、酸水解提取和碱水解提取进行了比较,碱水解提取的多酚得率和抗氧化活性最高,确定其为最佳提取方法。对碱水解提取物中的多酚进行了鉴定,共鉴定出9种多酚,分别为:原儿茶酸、p-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、香草醛、芥子酸、p-香豆酸、反式阿魏酸、水杨酸。3.麦麸多酚的纯化、分离及体外抗氧化活性测定:对大孔树脂纯化麦麸多酚粗提物的工艺条件进行了研究,确定了最佳纯化工艺:树脂用量4 g,样品浓度0.5 mg GA/m L,上样体积250 m L,样品流速1.4 m L/min;洗脱液为乙醇水溶液,体积分数60%,流速2 m L/min。DPPH-HPLC在线抗氧化监测结果显示反式阿魏酸对抗氧化活性的贡献最大,其次是芥子酸。Prep-HPLC进一步分离纯化物,收集两个保留时间段内的洗脱液,得到组分1和组分2。测定了粗提物、大孔树脂纯化物及Prep-HPLC分离出的两种组分的总多酚纯度、反式阿魏酸含量和体外抗氧化活性,这些指标的结果具有一致性,从高到低依次为:组分2＞组分1＞大孔树脂纯化物＞粗提物。4.麦麸多酚抗氧化活性功能评价:建立了H2O2损伤Caco-2细胞模型,研究麦麸多酚预处理对降低H2O2损伤的作用效果。在损伤模型中,细胞存活率下降至正常细胞的67.06±3.37%,胞内ROS水平升高至正常细胞的188.78±4.16%,抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活力分别降至18.83±2.02,5.70±0.25,79.90±7.01 U/mg prot。麦麸多酚预处理可显著改善这些指标,其中组分1的作用效果最为明显,组分1预处理组的细胞存活率升高至正常细胞的87.47±2.69%,胞内ROS水平下降至正常细胞的147.75±10.41%,抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活力分别提高至27.68±0.54,7.95±0.47,127.21±6.83 U/mg prot。这可能与组分1中各组分间的协同增效作用有关。