【摘 要】
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氧化压力、缺氧及高温等不利环境条件,通常会引发生物体的压力应激反应,来应对其对机体的毒性损害以维持机体的代谢平衡。本文利用秀丽隐杆线虫为模式生物来研究14-3-3、AMPK
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氧化压力、缺氧及高温等不利环境条件,通常会引发生物体的压力应激反应,来应对其对机体的毒性损害以维持机体的代谢平衡。本文利用秀丽隐杆线虫为模式生物来研究14-3-3、AMPK两个保守的蛋白家族对热抗性的调节功能。前期研究结果显示,秀丽隐杆线虫中编码14-3-3蛋白的基因ftt-2在多个组织广泛表达,但仅在咽部肌肉表达ftt-2能显著延长个体寿命并增强热抗性。本文首先通过遗传学方法分析了咽部肌肉表达ftt-2热抗性增强对抗性调节因子daf-16和sir2.1的依赖性,结果显示咽部肌肉表达ftt-2热抗性增强有其他的机制。本文进一步通过RT-qPCR检测了咽部肌肉表达ftt-2转基因线虫中几个热激蛋白(HSPs)基因表达水平,结果显示在热激处理后,咽部肌肉表达ftt-2转基因线虫热激蛋白表达水平较野生型增加的更显著,暗示了其热抗性的增加可能与热激蛋白表达水平的升高相关。为了研究AAK-2在热应激反应中的调控功能,我们构建了AAK-2不同基因亚型及缺失AAK-2不同蛋白结构域的转基因线虫,并分析它们对热敏感的aak-2突变体的拯救情况。实验结果显示,AAK-2蛋白N端保守的激酶区及该区域上的第181位苏氨酸(Thr)在热应激反应中起着关键作用。鉴于14-3-3和AMPK蛋白的高度保守性,以及已有研究表明应激调控机制在进化上也具有一定保守性,本文的研究结果将有助于加深人们对于14-3-3及AMPK蛋白家族对应激调控的作用机制的了解与认识。
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