杨木变色菌的分离鉴定及生防细菌的研究

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杨树作为我国主要的速生树种,在种植及板材加工领域越来越受重视。目前,杨木板材生物变色已给木材加工业造成了巨大的损失,研究杨木变色菌及其生物防治具有很现实的经济意义。本研究采用了组织分离法和诱导法分离到来源不同的变色菌14株,对这些菌株进行了变色能力测定及形态学鉴定,并做了生物学特性研究;选取了6种有代表性的变色菌作为供试菌株,通过平板对峙法、发酵滤液抑菌试验进行了生防菌的筛选,进行了室内木片变色防治试验,并初步研究了拮抗菌株的抑菌机理。内容如下:1.分离到14个来源不同的变色菌株,经形态学鉴定归属于2亚门3纲3目6属7种,分别为可可球二孢[Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.&Maubl.]、Lasiodiplodiarubropurpurea Burgess.&Barber.、Lasiodiplodia crassispora Burgess,Barber&Pegg.、多隔镰刀菌(Fusarium decemcellulare Brick.)、长喙壳[Ceratocystis adiposa(Butl.)Moreau.]、鞘孢菌(Chalara urceolata Nag Raj&W.B.Kendr.)、群生小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)及链格孢(Alternaria sp.),其中链格孢的两个菌株未鉴定到种。2.木片变色试验显示,球色单隔孢属(Lasiodiplodia theobromae,L.rubropurpurea,L.crassispora)的变色菌引起杨木变色的速度最快,链格孢(Alternaria sp.)次之,其余的几种菌变色较慢。3.变色菌生物学特性研究表明,14个菌株对极酸条件都比较敏感,在pH2大部分菌株停止生长,适合生长的pH范围大致为在5~9,在强碱性条件pH11下都能生长。温度试验表明,大部分变色菌对温度非常敏感,生长的温度范围一般在10℃~35℃,其中,链格孢、群生小穴壳、多隔镰刀菌、鞘孢菌和长喙壳其最适生长温度范围为25℃~30℃,而球色单隔孢属(Lasiodiplodia theobromae,L.rubropurpurea,L.crassispora)的三种菌最适生长温度范围为30℃~35℃;光照试验结果表明,光照对Lasiodiplodia theobromae、L.rubropurpurea、L.crassispora、长喙壳和群生小穴壳的生长有促进作用,试验中还发现在全光条件下有利于球二孢产生子实体,也有利于多隔镰刀菌产生粘性孢子团。试验证明分离至不同地区和寄主的相同菌株,其在不同pH、温度及光照下表现出一定的差异,这表明同一菌株在不同的环境下生长,其生物学特性也会发生一些变化。4.从土壤和未变色杨木组织中分离到204株细菌,并采用平板对峙法筛选出9株拮抗菌,它们与6种供试变色菌对峙都能形成拮抗透明带:用生长速率法复筛,拮抗菌B4抑菌效果最好,抑菌率都在90%以上,将其作为进一步研究的对象。5.通过室内木片变色防治试验,用发酵液处理过的木片接种变色菌10d后,木片未发生变色,且接种的菌饼出现了萎缩;而对照组中的木片均发生了不同程度的变色,变色菌在木片上和木片周围生长,但在靠近处理组木片的一侧菌丝生长也受到了抑制。6.B4菌株抑菌机理研究表明,B4菌株的拮抗物质可抑制变色菌菌丝生长和孢子萌发,用发酵滤液处理后,变色菌菌丝变形,原生质外溢,孢子不萌发或萌发产生不正常的芽管或孢子畸形、肿大,形成圆球状泡。
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