目的:观察积雪草甙联合抗生素治疗伴结节损害痤疮的临床疗效及安全性,并通过免疫组化的方法了解在炎症发展过程中,积雪草甙对IL-1β在组织中表达的影响。为积雪草甙在临床的广泛应用提供理论基础。方法:一．临床观察:1．选取106例病人,均为我院痤疮专科门诊诊断为痤疮并伴有结节损害的患者,随机分为治疗组和对照组。其中治疗组56例,对照组50例。两组在年龄、性别、病程上无显著性差异(P>0．05),具有可比性。2．治疗组给予消痤合剂一日2次,每次30ml;四环素一日三次,每次0．25g;积雪草甙片一日三次,每次24mg。对照组仅给予四环素和消痤合剂,用法同上。3．设定一周为一个疗程,共观察4个疗程。在用药后第1、2、3、4周对患者的各种皮损进行计数,并对治疗前后病情总疗效和单纯结节疗效进行评分,同时记录不良反应。4．观察结束后将数据进行统计分析,计数资料用x2检验,计量资料用u检验。二．实验研究1．痤疮丙酸杆菌培养:冻干痤疮丙酸杆菌以脑心浸液溶解后,室温下放置数分钟,取少许溶液培养于5％血液琼脂,厌氧环境下35-37℃培养5-7天,用生理盐水洗涤3次,调整痤疮丙酸杆菌浓度为2×1010／ml备用。并经镜下观察确定为棒状痤疮丙酸杆菌。2．造模:小鼠背部剪毛,约1×1厘米大小,每只小鼠三处,将已培养的痤疮丙酸杆菌用生理盐水稀释两次后接种注射到小鼠的皮下,每一点注射2000万单位痤疮丙酸杆菌,注射后每日观察小鼠局部皮肤的变化。3．分组:将40只实验小鼠随机分为四组,积雪草甙+四环素组、积雪草甙组、四环素组、空白对照组,每组10只小鼠。4．灌胃:在造模后第7天,积雪草甙+四环素组给予积雪草甙混悬液0．25ml(0．144mg／ml)和四环素混悬液0．25ml(1．5mg／ml)灌胃。积雪草甙组给予积雪草甙混悬液0．25ml(0.144mg/ml)灌胃。四环素组给予四环素混悬液0．25ml(1．5mg／ml)灌胃。空白对照组给予生理盐水0．25ml灌胃。按规定剂量于每日上午8-10时给药。(《实验动物学》湖北科学技术出版社p277常用实验动物及人的体表面积比例表)5．光镜标本制作及观察:在造模后第3、7、10、14、21天切除小鼠皮肤,10％甲醛固定,按石蜡切片常规处理,HE染色,在光镜下观察接种部位成纤维细胞显微结构的改变。6．免疫组化制作及观察:石蜡切片后,采用SABC法染色,在光镜下观察。7．统计:在高倍镜(10×40)下观察组织中IL-1β表达阳性细胞的数量,共选取10个视野,取其平均数,采用SPSS13．0统计软件包,数据均以均数±标准差(x±s)表示,组间计数资料用t检验。结果一．临床观察治疗组痊愈率19．6％,显效率51．8％,总显效率71．4％;对照组痊愈率18％,显效率34％,总显效率52％;治疗组总显效率高于对照组,经统计学分析有显著性差异(P<0．05)。治疗组四周结节消退率60．7％,高于对照组42％,经统计学分析有显著性差异(P<0．05)。二．实验免疫组化结果:IL-1β在组织中表达的阳性细胞,其胞浆和胞核为褐色,阳性细胞主要为成纤维细胞、淋巴细胞和巨噬细胞。给药两周后积雪草甙+四环素组和积雪草甙组中的阳性表达率低于四环素组和空白对照组,积雪草甙+四环素组和积雪草甙组与四环素组、空白对照组之间均有统计学意义,但积雪草甙十四环素组和积雪草甙组之间无统计学差异。结论积雪草甙联合抗生素治疗伴结节损害的痤疮疗效肯定,明显优于对照组。积雪草甙可能在炎症早期诱导IL-1β在组织中表达减少,从而减轻炎症反应和抑制成纤维细胞的增生,促进炎性结节的消退,并预防纤维性结节和瘢痕的产生。