宁波口岸进境种苗中长针科线虫鉴定

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2011-2012年宁波口岸对进境种苗进行植物检疫时,从种苗根及根围的土壤或介质中截获多种长针科线虫,而长针科线虫中的传毒种类属于检疫性有害生物,因此对截获的长针科线虫进行了形态学和分子生物学鉴定,这对防止检疫性有害生物传入我国具有重要意义。从宁波口岸共截获1种长针属(Longidorus)线虫和5种剑属(Xiphinema)线虫,其中有1种长针属线虫和2种剑属线虫是传毒性检疫性有害生物,分别为马丁长针线虫(L. martin)、里夫丝剑线虫(Xiphinema rivesi)和短颈剑线虫(X. brevicollum),前2种线虫均是我国口岸首次截获的有害生物。马丁长针线虫从日本进境的鸡爪槭根际分离;属于美洲剑线虫组的里夫丝剑线虫从意大利进境的苹果苗木和地中海柏木中截获;短颈剑线虫存在于日本进境的罗汉松和鸡爪槭中;喜马拉雅剑线虫(X. himalayense)从日本进境的罗汉松根际分离;肥厚剑线虫(X. pachtaicum)从意大利进境的白栎中分离。非美洲剑线虫组的湖南剑线虫(X. hunaniense)从日本进境的罗汉松、鸡爪槭和茶梅中截获。对6种长针科线虫进行核糖体DNA(rDNA)的18S、ITS1和28S-D2/D3区的PCR扩增,产物经测序,共获得6个种的28S-D2/D3区序列,4个种的18S区序列,以及4个种的ITS1区序列,将这些序列与提交至GenBank相近种的对应序列进行比对,用邻接法(Neighbour-joining)构建系统进化树。基于长针属线虫rDNA的28S-D2/D3区序列构建的系统发育树确认了马丁长针线虫的分类地位,而基于剑属线虫rDNA的ITS1和28S-D2/D3区序列构建的系统进化树则揭示了5种剑线虫的进化关系与其形态鉴定特征相吻合。
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