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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,发病率仅次于宫颈癌,部分城市有超过宫颈癌的倾向。每年全球约135万人被诊断为乳腺癌,约40万人死于该病,并且其发病率逐年上升。乳腺作为女性的第二性征器官,当其患癌时,势必给患者造成心理、生理的双重负担,影响以后的工作和生活。因此应当正确认识和研究影响预后的各种因素,检测患者免疫功能,采取各项有效的措施,选择合适的治疗方案,改善乳腺癌的预后,进而提高患者的生活质量。影响乳腺癌预后的诸多因素之一就是生物学因素,它包括各种肿瘤生长和转移相关的生物学因子等。国内学者对其研究较多的因子有:ER(雌激素受体),PR(孕激素受体)和研究颇为深入的P53基因,尤其是突变型P53能引起细胞的转化,促进细胞癌变;此外HER-2蛋白表达状况也与靶向治疗效果存在相关性,因此检测HER-2的必要性就更为重要,它不但可以作为判断肿瘤预后的独立指标,还对乳腺癌临床治疗方案的选择提供重要指导;目前国内研究将肿瘤耐药方面和癌基因一起研究的较少,所以本研究还加测了指标TOPⅡ(拓扑异构酶Ⅱ),它作为许多抗肿瘤药物的靶点,在肿瘤多耐药中起很大的作用,耐药细胞通过不同环节调节其酶的活性及表达量,维持其耐药表型。深刻认识其在肿瘤耐药中的意义,有助于解释复杂的耐药现象,同时有助于开发和利用以TOP为靶点的新药,增加对癌细胞的杀灭作用;随着研究的不断深入,我们对乳腺癌的临床病程及生物学行为有了更为充分的估计。恶性肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能,尤其是与细胞免疫功能密切相关,随着流式细胞仪投入临床应用以来,淋巴细胞亚群及各种细胞因子检测项目的发展迅速,为我们提供了新的临床诊断学的模式,即临床医生在获知每一个病人免疫状态的客观评估后,以提升免疫功能为主的综合治疗将对患者的预后大有益处。目的:应用流式细胞术(FCM)检测乳腺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群的水平,探讨乳腺癌患者机体免疫状况,来指导临床免疫治疗。同时测定乳腺癌患者ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ的表达,探讨其与乳腺癌患者机体免疫功能、肿瘤临床分期、淋巴结转移的关系及临床意义。方法:实验针对承德医学院附属医院2010年7月至2011年12月间患有女性原发性乳腺癌患者120例(实验组)和40例乳腺良性病变患者(对照组),检测其外周血中CD3~+、CD4~+、CD8~+、及CD4~+/CD8~+的比值变化,实验组入院后行乳腺癌改良根治术,取其标本送病理科,制备肿瘤组织的石蜡切片,采用免疫组化S-P法,检测肿瘤组织中ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ的表达,结合病理和临床资料进行统计,采用SPSS11.0统计软件包进行统计。结果:1实验组与对照组外周血中T淋巴细胞亚群的表达实验组中120例原发性乳腺癌患者外周血与对照组外周血中CD3~+、CD4~+比较,均明显减低(P <0.05);CD4~+/CD8~+,略低于对照组,而CD8~+高于对照组,但无统计学意义。2实验组中T淋巴细胞亚群在临床各期的表达测得Ⅰ期乳腺癌T淋巴细胞亚群与对照组之间相比无明显改变,无统计学意义;而Ⅱ,Ⅲ期病人外周血中CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+的数值显著低于Ⅰ期患者和对照组测得数值(P <0.05);而CD8~+比例则相反,显著高于Ⅰ期患者和对照组的测得值(P <0.05)。3实验组中T淋巴细胞亚群的变化与淋巴结有无转移的关系实验组中50例淋巴结转移的患者外周血中CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+显著低于淋巴结未转移的70名患者(P <0.05);而测得的CD8~+数值明显高于淋巴结未转移患者,有显著差异(P <0.05)。4ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ在临床各期的表达实验组标本中ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ在的临床Ⅰ期表达分别为65%、71%、29%、24%、65%;在Ⅱ期中表达分别为45%、47%、55%、51%、51%;在Ⅲ期中表达为25%、25%、75%、73%、63%。ER、PR的表达随临床分期的递增而逐渐减低,临床Ⅰ期与Ⅱ期,Ⅱ期与Ⅲ期间比较有显著性差异(P <0.05);HER-2,P53的表达与临床分期的递增而逐渐增强,临床Ⅰ期与Ⅱ期,Ⅱ期与Ⅲ期之间比较有显著性差异(P<0.05); TOPⅡ的表达与临床分期无关(P>0.05)。5ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ与淋巴结有无转移的关系实验组有淋巴结转移的患者中ER,PR,P53,HER-2及TOPⅡ的表达为28%、28%、72%、68%、40%;在未转移的患者中为49%、51%、50%、47%、70%。ER、PR的表达随着淋巴结转移而表达减低,两组之间比较有显著性差异(P <0.05);HER-2,P53的表达随淋巴结转移而表达增强,有显著性差异(P <0.05);TOPⅡ的表达随着淋巴结转移呈减低趋势,且有统计学意义(P <0.05)。6ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ在不同病理类型乳腺癌中的关系实验组中120例患者根据不同的病理,分为:原位癌11例、浸润性导管癌56例、浸润性小叶癌26例、粘液腺癌13例、其他24例,ER、PR、P53、HER-2及TOPⅡ在不同病理癌组织的中表达无显著性差异(P>0.05)。7实验组中HER-2的表达及与ER、PR、P53、TOPⅡ的关系实验组中ER、PR、P53、HER-2,TOPⅡ的阳性表达分别是48(40.00%)、50(42.67%)、71(59.17%)、67(55.83%)、69(57.50%);67例HER-2阳性中P53表达阳性的50例、ER阳性12例、PR阳性13例、TOPⅡ阳性49例,HER-2与P53、TOPⅡ呈正相关,与ER、PR呈负相关(P <0.05)。8实验组中HER-2的表达及与T淋巴细胞亚群的关系实验组中HER-2表达阳性共67例,其中阳性低表达例数为35,高表达例数为32,CD3~+、CD4~+在HER-2的不同表达的癌组织中没有显著性差异;而CD8~+在HER-2高表达中的乳腺癌中显著高于HER-2低表达的癌组织(P <0.05)。9实验组中TOPⅡ的表达及与T淋巴细胞亚群的关系实验组患者TOPⅡ表达阳性共69例,其中表达呈低表达例数为35,高表达例数为34,CD3~+、CD4~+、CD8~+在TOPⅡ不同表达的癌组织中无显著差异(P>0.05)。结论:1乳腺癌患者免疫功能与乳腺癌恶变的发生、发展、淋巴结转移有一定相关性。随着病情的进展,机体免疫功能逐渐下降,对患者的预后有一定影响,同时说明了乳腺癌患者免疫治疗的必要。2ER、PR、P53、HER-2的表达随着临床分期增高和淋巴结发生转移而呈显著变化,说明四者是预测乳腺癌分化程度的重要指标。3乳腺癌患者TOPⅡ的表达随着淋巴结发生转移而呈显著变化,其与肿瘤细胞耐药性是否有关,还需进一步研究。综上,ER、PR、P53、HER-2在乳腺癌的发生、发展和淋巴结转移过程中起重要作用;乳腺癌患者外周血T细胞亚群在不同阶段出现改变,显示了乳腺癌患者细胞免疫功能受到抑制或受损程度,也反映了机体的免疫状况,这为乳腺癌免疫治疗及患者预后指标的测定提供参考,联合检测免疫组化指标和患者免疫功能的表达水平及其相关性,对判断乳腺癌患者恶性程度、淋巴结转移、及术后治疗方案的选择提供重要依据,有一定参考价值。