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背景与目的:急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia ,APL）是急性髓系白血病的一种特殊类型,约占成人急性髓系白血病的10%,是临床上第一个应用诱导分化和针对肿瘤特异性标志分子进行治疗并获显著疗效的血液恶性肿瘤。使用全反式维甲酸（all-trans retinoic acid ,ATRA）和三氧化二砷（ arsenic trioxide ,ATO,As2O3）治疗APL以来,APL的完全缓解率已达到70%以上。但白血病复发一直是困扰临床进行缓解后巩固、维持治疗及影响患者总生存期的主要障碍,而复发的根源主要是来自体内残留白血病细胞,即急性白血病微小残留病（MRD）。APL最为常见的染色体易位是t （ 15; 17） （ q22; q21） ,阳性率约占98%。这种异常可以累及维甲酸受体α（RARα, Retinoic acid receptorα）, t （ 15; 17）造成早幼粒细胞白血病（ PML, promyelocytic leukemia）基因与RARα重排,形成PML/RARα融合基因。实时荧光定量PCR方法可以检测融合基因产物,了解肿瘤细胞在治疗中的消减情况,对监测MRD具有很大意义。本实验旨在建立用实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARαmRNA的技术平台,探讨急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因表达水平与病情及疗效的关系。方法:用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释,作为标准品,ABL作为内参,建立标准曲线。采用Taq Man法进行实时定量PCR,并对方法的可靠性,可重复性及灵敏性进行测定。对14例初治的APL患者（经定性PCR结果确定均为PML/RARα融合基因L型）在初治、诱导缓解及巩固治疗三个时期的PML/RARαmRNA转录本水平进行动态定量监测。结果以校正比值（NQ,normalized quotient）表示,NQ =PML/RARαmRNA的拷贝数/ABLmRNA的拷贝数×105。结果:本实验建立了实时定量PCR的方法来检测L型PML/RARα融合基因,绘制了该基因定量PCR的标准曲线,其回归系数为0.99876。实验可以检测出10-5ugNB4细胞cDNA中PML/RARα的融合基因。其重复性和稳定性测定的Ct值循环阈值Ct（cycle threshold）变异系数分别为1.77%和2.11%。14例患者初治时骨髓PML/RARα融合基因平均水平为3731拷贝,经全反式维甲酸、AS2O3双诱导缓解时PML/RARα融合基因平均水平为231拷贝,化疗与维甲酸序贯巩固治疗两个疗程后PML/RARα融合基因平均水平为116拷贝。1例患者初治时NQ为5872,在经过维甲酸+三氧化二砷双诱导后NQ为267,经过两个周期序贯治疗后虽然此时患者处于完全缓解期,但其转录水平拷贝数与前相比轻度升高为284,80天后患者出现复发,转录本水平升至为6247。经过ATRA+化疗治疗后转录本水平又逐渐下降至1030。结论:本方法建立的实时定量PCR敏感性好,特异性高,重复性好;可以定量PML/RARα融合基因拷贝数;可用于急性早幼粒细胞的诊断和微小残留病的检测。治疗后患者的PML/RARα融合基因转录本水平随时间明显下降,复发时基因转录本水平又升高,其表达水平与临床疾病进展治疗关系一致,这有助于监测白血病微小残留病变,评价疗效和判断预后。