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套细胞淋巴瘤(Mant1e Cell Lymphoma,MCL)是一种具有侵袭性和不可治愈性的B细胞淋巴瘤,约占非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’s Lymphoma,NHL)的3%～10%。多数病人诊断时处于Ⅲ-Ⅳ期,男性发病率较高(男:女=2:1)。染色体t(11;14)(q13;q32)易位导致细胞周期蛋白D1(CyclinD1)过度表达是MCL发病机制的核心,此外继发性遗传改变所引起的细胞周期失调、DNA损伤修复异常、细胞凋亡、表观遗传修饰以及各种信号通路的失调,也是不容忽视的。目前,随着对MCL的深入研究,靶向药物治疗取得了一定的进展。B细胞受体(B cell receptor,BCR)信号通路的异常及过度活化是多种B细胞淋巴瘤生长和存活的关键因素。BTK(Bruton’s tyrosine kinase)是BCR信号通路中的关键激酶,在MCL细胞中过度表达,因此靶向BTK是治疗MCL的重要手段。依鲁替尼(Ibrutinib,IBN)是第一代不可逆BTK抑制剂,于2013年被FDA批准用于治疗复发/难治性MCL。虽然IBN在MCL的临床应用中疗效显著,但同时也伴随着多种不良反应及IBN耐药的出现。因此,探寻新的治疗方案对MCL的治疗具有重要意义。IBN耐药的突变蛋白与HSP90(Heat shock protein 90)结合增加了前者的稳定性,而HSP90与客户蛋白的结合受组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)调控。HDAC通过使组蛋白和非组蛋白去乙酰化而在癌症中发挥关键作用,这使HDAC成为了重要的抗肿瘤靶点。HDAC抑制剂(HDAC inhibitors,HDACIs)通过调节基因转录、DNA损伤修复、细胞周期及凋亡等发挥抗肿瘤作用。目前,多种HDACIs被用于血液系统肿瘤的治疗,并表现出良好的治疗效果。此外,联合应用HDACIs和其他抗癌药物在改善抗癌效果中展现了协同作用,HDACIs和BTK抑制剂的联合应用在包括IBN耐药在内的多种B细胞淋巴瘤中疗效显著,抗肿瘤效果明显强于单一药物的应用。靶向BTK和HDAC,既能抑制BCR信号传导通路的关键信号分子,又能降解BCR及非BCR信号传导通路的关键蛋白,发挥双重抑制作用,增强对B细胞淋巴瘤的抑制作用。我们课题组前期设计合成了多个系列新型BTK/HDAC双靶点抑制剂。本论文在前期研究的基础上,进一步优化设计,保持1,3-二取代-4-氨基吡唑并嘧啶作为BTK抑制剂部分的母核结构,使用取代吡啶胺酰苯基与4-苯氧基苯基作为BTK抑制剂部分的疏水性基团,母核与疏水性基团相连作为HDACIs的表面识别基团(Surface Recognition Group,SRC),以异羟肟酸作为HDACIs的锌离子螯合基团(Zinc Binding Group,ZBG),不断改变连接基团(Linker)的结构和长度,考察不同Linker和疏水性基团对生物活性的影响,设计合成了 Yp系列化合物。所合成的21个目标化合物通过氢谱(1H-nuclear Magnetic Resonance,1H-NMR)、碳谱(13C-nuclear Magnetic Resonance,13C-NMR)以及高分辨质谱(high-resolution mass spectrometry,HRMS)进行结构确证。我们对该系列化合物进行了初步的体外生物活性评价,大部分化合物在1μM的浓度下对BTK的抑制率大于80%,弱于阳性药IBN;随着Linker碳链长度的延长,化合物对HDAC的抑制活性逐渐增强,化合物Yp11对HDAC具有最优的抑制活性,与SAHA相当;我们对上述化合物进行了 MCL细胞株的抗增殖活性实验,该部分化合物对多株MCL细胞表现出良好的生长抑制活性,其中双靶点化合物 Yp17(BTKIC50=99.6nM,HDACs IC50=261.9nM)和 Yp21(BTK IC50=244.9 nM,HDACs IC50=157.5 nM)表现出明显优于 IBN的抗增殖活性,尤对IBN耐药的细胞株(Maver-1、Z138、Rec-R、Mino-R)其抗增殖活性是IBN的5-14倍;此外,Yp11、Yp17和Yp21对HepG2细胞也表现出中等强度的抑制活性。该研究结果对发现新型BTK/HDAC双靶点抑制剂治疗MCL提供了思路,为抗MCL候选药物的开发奠定了基础,后期我们将对作用机制进行深入研究。