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绿原酸(CGA)作为一种重要的天然多酚物质,具有显著的降血压、滋肝润胆、抗菌、预防肿瘤等多种药理活性,是许多中成药的有效成分,近年来在不断受到人们的重视,并被广泛应用于化妆品、食品、医药等行业。因此,研究高纯度绿原酸的制备工艺技术,对我国国民经济和社会发展具有重要意义。本论文以杜仲叶粗提物为实验原料,通过严谨的实验设计,研究出了一条容易操作,稳定可靠的高纯度绿原酸制备工艺路线,并在此基础上进行了中试放大研究,所得主要研究结果如下:(1)定量方法的建立以高效液相色谱仪为检测仪器,建立了定量检测杜仲叶粗提物中绿原酸的方法,并对其进行方法学验证。结果显示,该HPLC法基线稳定,绿原酸与其他成分分离度高,回收率高,因此可以作为杜仲叶提取物中绿原酸的检测和定量分析方法。(2)大孔树脂初步分离纯化筛选出ADS-21最佳大孔吸附树脂,并发现该树脂在25℃条件时达到最大吸附量,同时满足Langmuir方程和伪二级动力学方程。ADS-21树脂分离纯化粗提物中绿原酸的最佳工艺条件为:1)吸附:吸附液pH=2,温度25℃,上样流速2 BV/h,上样浓度3.01 mg/m L,上样体积8 BV;2)解吸:解吸流速2 BV/h,乙醇浓度及用量为40%乙醇3 BV,50%乙醇10 BV。通过大孔树脂吸附解吸一次纯化后,得到绿原酸粗品的纯度由原来的5.01%提高到38.1%,提高了7.62倍,绿原酸回收率为92.8%。(3)树脂和硅胶除杂精制采用树脂和硅胶精制绿原酸粗品,通过研究得到X-5树脂除杂最佳工艺条件:pH≈6,当层析柱直径:高(cm:cm)=3.5:35时,料液比为M:V(g:mL)=1:10;硅胶除杂最佳工艺条件:当玻璃层析柱直径:高(cm:cm)=3.5:35时,料液比为M:V(g:m L)=1:100。解吸浓缩液通过硅胶和X-5型树脂吸附除杂后,绿原酸的纯度由38.1%提高到73.2%,产率65.3%。(4)活性炭脱色精制以活性炭为脱色材料对绿原酸粗精品进行精制,得到最佳脱色工艺条件为:1)吸附:200目以上活性炭,温度30℃,料液比M:V=2:50(g:mL),时间1.5 h;2)解吸:温度50℃,乙醇浓度50%,时间5 h,解吸量7 BV,解吸三次。通过活性炭脱色精制后,得到纯度为93.4%接近无色的绿原酸精品,产率为88.7%。(5)实验室放大研究实验室放大研究结果表明,放大实验和预实验所得绿原酸精品的纯度和总得率基本一致,均在92%和60%左右。因此,该工艺技术路线总体稳定,实用可靠,适用于从杜仲叶粗提物中工业化制备高纯度绿原酸。