目的：进行性肌营养不良症（progressive muscular dystrophin，PMD）是一组原发于肌肉组织的遗传性疾病，其共同表现为缓慢进行的肌肉萎缩、肌无力及不同程度的运动障碍。常见的类型有杜氏型肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy，DMD）、贝克型肌营养不良（Beckermuscular dystrophy，BMD）、肢带型肌营养不良（Limb girdle musculardystrophy，LGMD）、面肩肱型肌营养不良、眼咽型肌营养不良、先天型肌营养不良、Emery-Dreifuss型肌营养不良、远端型肌营养不良、强直性肌营养不良。其中DMD和BMD为最常见的进行性肌营养不良类型，都是dystrophin基因突变所致的X连锁隐性遗传肌病。LGMD是一组具有相似临床表现但是发病机制迥异的疾病。其主要临床表现为四肢近端肌、腰带肌肌无力、肌萎缩进行性加重。LGMD可为常染色体显性（LGMD1型）、隐性（LGMD2型）遗传。再根据基因和蛋白缺陷分为不同的亚型。根据目前明确的受累基因的不同LGMDl分为LGMDlA～LGMDlH八种类型，LGMD2又分为LGMD2A～LGMD2Q十七种类型。进行性肌营养不良的辅助检查皆示血清CK不同程度增高；肌电图呈典型肌源性损害特点。肌肉病理表现大致相似：肌纤维大小不同和肌纤维坏死、再生，明显的结缔组织增生。本研究分别利用肌肉常规组织染色和免疫组化方法对拟诊PMD的病人肌肉标本进行检测，总结其临床和病理特点，对常见的进行性肌营养不良类型进行鉴别。为日后更准确分型诊断提供临床及病理理论依据。也对判断疾病预后、遗传咨询有重要作用。方法：研究分为2组-实验组和对照组，实验组23例，临床和病理资料保存完整并临床确诊为肌营养不良的病人。总结其发病年龄、首发部位、进行性肌无力部位及程度、肌萎缩部位、是否伴有腓肠肌假性肥大、CK值、肌电图结果、肌肉常规染色结果等临床病理特点。对照组2例，临床和病理资料保存完整，并确诊为肌肉病理正常者。经液氮预冷的异戊烷中速冻的冰冻肌肉标本制成8um冰冻切片。进行H-E染色、改良Gomori三色（MGT）染色、 NADH-TR染色、SDH染色、NSE非特异性酯酶染色、ORO脂肪染色、PAS糖原染色、ATP酶染色光镜观察形态学变化；用抗dystrophin Rod、抗dystrophin C-terminal、抗dystrophin N-terminal、抗dysferlin、抗α-sarcoglycan、抗β-sarcoglycan、抗γ-sarcoglycan、抗δ-sarcoglycan蛋白的八种单克隆抗体做免疫组织化学染色（immunohistoche-mical staining，IHC）。结果：1在光镜下，实验组23例肌肉常规病例染色可见肌纤维呈角形或圆形外观，大小不一，间隙增宽,部分萎缩，明显核内移，结缔组织及脂肪组织不同程度增生，可见肌纤维变性、坏死及部分再生，偶见肌纤维间炎性细胞浸润，其中15例可见肌裂；NADH染色可见分叶肌纤维、部分肌纤维深染，18例NADH染色可见肌纤维虫噬状改变；SDH染色示线粒体酶活性出现异常改变；ATP染色示12例两型肌纤维镶嵌排列正常分布，I型肌纤维占优势者5例，II型肌纤维占优势者6例；16例ORO染色示脂肪成分不同程度增高；16例PAS染色示糖原成分轻度增高。对照组肌肉病理染色示肌束内肌纤维排列紧密，大小相似，呈角形外观，未见变性、坏死和吞噬现象，无核内移增加，NADH-TR染色、SDH染色、NSE染色、ORO染色和PAS染色未见异常，ATP酶染色两型肌纤维基本呈镶嵌排列。2在23例临床拟诊肌营养不良病人肌肉中，经免疫组织化学染色共发现dystrophin染色缺陷10例（dystrophin N/C/R至少一个有完全缺失（－）的4例，显色不完整或减弱（±）6例），dysferlin染色缺陷9例（dysferlin完全缺失1例，显色不完整或减弱8例），α-sarcoglycan染色缺陷11例（α-sarcoglycan完全缺失1例，显色不完整或减弱10例），β-sarcoglycan染色显色不完整或减弱10例，γ-sarcoglycan显色不完整或减弱9例，δ-sarcoglycan显色不完整或减弱9例。对照组标本肌纤维膜免疫组化染色均无减弱和缺失。3进行性肌营养不良患者的临床特点3.1dystrophinopathyDystrophinopathy为一组疾病，临床表现多样。实验组有10例符合dystrophinopathy诊断，DMD4例，BMD6例。均为男性。其中1例有家族史。患者的血清CK水平均增高。DMD患者多为儿童期隐袭起病，多表现为双下肢近端无力，鸭步，易跌倒，也可见单侧肢体无力。病情进展迅速。其中例13青少年起病，临床症状相对良性，病情进展较慢，故临床诊断为BMD，经免疫组化染色示dystrophin完全缺失，sarcoglycan部分减弱，符合DMD诊断标准。BMD患者多见青少年起病，症状与DMD相似，肌无力程度较DMD轻，可伴有扩张性心肌病，病情进展相对较缓，肌电图示肌源性损害。肌肉活检组织学检查示肌源性损害，可见肌纤维萎缩、变性、坏死,肌分裂，肌纤维间质增宽，脂肪细胞侵入，结缔组织增生，核内移、增大、深染，部分可见虫蚀现象。3.2sarcoglycanopathy病例6男，22岁，进行性加重四肢近端无力14年，鸭步，无肌萎缩、腓肠肌肥大，无感觉障碍及锥体束征，无阳性家族史，血清CK值4491U/L，心电图示短PR间期。肌肉病理常规检查：肌肉部分区域脂肪化，肌纤维排列较疏松，大小不一，可见多数萎缩呈圆形外观，偶见变性、坏死和吞噬现象，偶见肌分裂、肌再生和核内移。免疫组化染色示α-sarcoglycan完全缺失，β/γ/δ-sarcoglycan显色不完整，dystrophin R/N显色减弱，dysferlin膜显色减弱、胞质染色加深，考虑为sarcoglycanopathy。结合其肌肉常规病例及免疫组化染色，临床和病理诊断为LGMD2D。3.3Dysferlinopathy病例21女，38岁，14年前最早出现右下肢远端无力，随病情进展相继出现双上肢近端无力及左下肢远端无力，CK4095.7U/L，肌电图示肌源性损害，当地肌肉活检后诊断多发性肌炎，于激素治疗，病情有加重。肌肉活检组织学检查示结缔组织和脂肪组织明显增生，部分血管管壁增厚，可见炎性细胞浸润。肌纤维萎缩、变性、坏死，可见核内移和肌分裂现象；可见多个分叶状肌纤维，部分表现为虫蚀样改变。与正常骨骼肌标本对照，免疫组化染色可见dysferlin缺失，dystrophin及sarcoglycan显色完整。结合临床及病例诊断为dysferlinopathy。结论：1PMD患者中dystrophin蛋白缺失最为常见（临床拟诊PMD的23例中确诊dystrophinopathy10例）；2蛋白诊断相对于临床诊断更准确；3BMD临床上很多地方与LGMD相似，肌肉病理表现无特异性；BMD散发病例与LGMD难做出鉴别，需要进一步行免疫组化检测；4dysferlinopathy容易误诊为多发性肌炎，应用免疫组化鉴别诊断；5肌细胞膜上dystrophin或sarcoglycan蛋白缺陷，都可能会造成对方的继发性减少，须同时染色比较。