Rap2属于Ras家族小分子量G蛋白,与Rap1具有60%的氨基酸序列相似性,其功能尚未得到阐明。近来,Rap2特异的下游靶蛋白RPIP9与肿瘤发生相关的研究结果提示Rap2可能参与体内肿瘤的发生。本研究室的前期研究也表明Rap2的过表达能够诱导HEK293细胞转化表型的形成。为了揭示Rap2在肿瘤发生中可能存在的功能,我们首先检测了Rap2在人肾癌肿瘤组织与正常癌旁组织中的活性化状态,发现人肾癌肿瘤组织中Rap2的活性化程度较正常癌旁组织显著增强,表明Rap2的高活性化与肾癌的发生相关。为了进一步研究Rap2诱导HEK293细胞转化的机制,本研究通过Rap2的瞬时转染及免疫细胞化学的方法研究了Rap2的表达对细胞形态的影响,结果发现,转染Rap2后HEK293细胞失去了原有的铺展状态,明显变圆,细胞微丝骨架结构紊乱,表现出细胞恶性转化的特征。为研究Rap2对细胞微丝骨架形态的调控的信号途径,细胞微丝骨架调控因子RhoA与Rap2被共表达于HEK293细胞中。GST-pull down分析表明Rap2的表达能够抑制外源表达的RhoA的活性,而细胞免疫荧光研究发现RhoA或RhoA活性化突变体RhoA-14V的共表达并不能使Rap2诱导的细胞微丝骨架紊乱得以恢复。因此,Rap2可能通过RhoA以外的信号途径调控细胞微丝骨架的组装。重组基底膜侵袭实验结果表明,稳定表达外源Rap2的HEK293细胞的侵袭能力明显高于非外源表达Rap2的对照组,表明Rap2的过量表达能够增强细胞的运动和侵袭能力。综上,Rap2可能作为原癌基因在肾癌发生中起调控作用,其诱导细胞转化的机制涉及到了微丝细胞骨架形态和细胞侵袭能力的调控。