蜂胶(propolis)是蜜蜂(Apis mellifera)从植物嫩芽和枝干的表面或伤口处采集的树脂,再混合蜂蜡、花粉及自身分泌物质等物质,最终形成地一种具有树脂芬香味的粘性物质。蜂胶具有抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等生物活性,这些活性与蜂胶的化学成分密切相关。蜂胶的化学成分复杂,蜜蜂在不同气候条件下采集不同植物的树脂,因此来自不同地区蜂胶中的化学成分存在差异,进而导致蜂胶生物活性的不同。中国作为世界蜂胶最重要的产地之一,产自中国的蜂胶的化学成分和生物活性已被广泛地研究。目前普遍认为中国蜂胶的化学成分以酚类成分为主,蜂胶的植物来源是杨属植物；但关于中国蜂胶中酚类成分组成的报道不近相同,此外中国胶源植物的研究也很少。因此,本论文对中国蜂胶中的酚类成分进行了详细地定性和定量分析,建立了中国蜂胶HPLC指纹图谱；此外分别通过酚类成分分析和工蜂采集蜂胶行为观察确定了中国蜂胶的胶源植物；最后研究了胶源植物树脂在不同生长季节的中酚类成分的变化。1.全国25个省市自治区随机采集108个蜂胶毛胶样品,运用超声波辅助75% 乙醇对蜂胶中酚类成分进行提取,通过HPLC-DAD、LC-MS及标准品进行定性分析,确定了中国蜂胶中的47种酚类成分。此外通过标品外标法对蜂胶中29种酚类成分进行定量分析,得到中国蜂胶中酚类成分的组成特征。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件计算得到了中国蜂胶的HPLC指纹图谱。2.采集杨属中毛白杨(Populus tomentosa Carr)、钻天杨(Populus nigra varitalica)、河北杨(Populus hopeiensis Huet Chow)、小叶杨(Populus simonii Carr)、加拿大杨(Populus canadensis Moench)、青杨(Populus cathayana)、欧洲黑杨(Populus nigra三.)和中华红叶杨(Populus deftadides)共8种杨树树芽,松科中白皮松(Pinus bungeana Zucc.)、华山松(Pinus armandii Franch)、美人松(Pinus sylvestris var. sylvestriformis)、油松(Pinus tabulaeformis Carr.)及雪松(Cedrus)分泌的树脂,及柳属中杨柳(Salix babylonica)和桦属中桦树(Betula)的树芽。采用超声波辅助75%乙醇提取以上各种树芽及树脂中的酚类成分,通过HPLC-DAD得到相应的HPLC图谱,与中国蜂胶的指纹图谱进行比较分析。发现来自杨属黑杨派中欧洲黑杨与美洲黑杨的杂交品种——加拿大杨树树脂提取物的HPLC图谱与中国蜂胶的指纹图谱的相似度最高(0.814),无论在酚类成分种类还是各成分含量上都较其他植物树脂吻合。因此目前研究表明中国蜂胶的胶源植物,是来自欧洲黑杨及其杂交品种,加拿大杨。3.工蜂采集蜂胶行为的观察是研究蜂胶胶源植物的直接方式。本实验于2013年6-9月通过对饲养在中国农业科学院蜜蜂研究所内(北京,香山)的6箱蜜蜂进行观察,发现工蜂仅采集加拿大杨树芽分泌的树脂(简称加杨芽脂)作为其蜂胶的植物来源。同时观察到,蜜蜂的采胶行为一般发生在雨后次日。分别对加杨芽脂、采胶工蜂后足携带的树脂和蜂箱中刮取的蜂胶的75%乙醇提取物中的酚类成分进行分析,发现加杨芽脂与工蜂后足树脂的相似度是0.977,加杨芽脂与蜂胶是0.896,蜂胶与工蜂后足树脂是0.911,三者之间的相似度非常高；此外加杨芽脂、工蜂后足携带的树脂和蜂箱中的蜂胶在物理性质上的差异也很小。因此,从工蜂采胶行为观察法得到中国蜂胶的胶源植物是加拿大杨。4.为研究加拿大杨分泌树脂中酚类成分的变化,于2012年11月—2013年10月,每月中旬采集加拿大杨树芽分泌的树脂(简称加杨芽脂),并用HPLC-DAD对其75%乙醇提取物中的物质进行分析。发现加杨芽脂的化学成分虽然会随分泌时问的不同而变化,但在6月—8月间的变化最小,此时加杨芽脂提取物的HPLC图谱与中国蜂胶的指纹图谱最为相似,分别为0.897,0.912和0.857。意大利蜜蜂在3月下旬—10月中旬是活动期,通过从加杨树脂随时间的变化规律可推测出蜜蜂采集蜂胶的时间集中在6月一8月间,并且此时蜂胶的酚类成分组成很稳定。