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高温胁迫是自然界中重要的的非生物逆境胁迫之一,会导致甜玉米产量和品质下降。热带亚热带的华南地区,高温已经成为制约该区甜玉米品质与产量的重要原因。目前华南地区甜玉米种植面积和消费持续增长,但在高温影响甜玉米农艺性状,生理生化及分子方面开展的研究还比较少。因此,研究高温对甜玉米的伤害机理,挖掘耐热甜玉米种质,对开展遗传研究及耐热育种有着重要的意义。本文在高温条件下研究不同甜玉米品种种苗转换过程中种子萌发、保护酶类活性及叶绿素荧光特性,并进行基因ZM-AQPIP1-5的克隆与分析。得到如下结果: 1.通过对31个甜玉米材料,不同温度下种子萌发的研究。表明26.5℃时平均芽长最长,达到了3.80cm,36℃为3.26cm,41℃平均芽长最短只有0.82cm。根长随着温度的升高也出现了相似的趋势,对于发芽率来说26.5℃发芽率最高,41℃发芽率最低。随着温度的升高发芽率降低,芽长变短,根长变短。表明适宜温度26.5℃条件下,甜玉米萌发正常,有利于甜玉米的出苗,温度为升高到36℃,甚至41℃高温时甜玉米种子萌发受到抑制,种子活力受到伤害,出苗率低,幼苗生长受到伤害,原因可能是高温加速了种子的老化,影响了发芽率。用隶属函数对发芽率、芽长、根长进行分析,综合隶属值存在差异,粤甜9号综合隶属值为0.4,表现出较好的耐热性,正甜68号、奥甜706综合隶属值大于0.6,表现出热敏感性。 2.通过对幼苗保护酶的活性与丙二醛含量的研究,表明36℃和41℃处理与26.5℃相比酶的活性出现一定程度上的提高,MAD含量逐渐增加趋势。总体上41℃酶活性较大,MAD含量较高。 3.利用叶绿素荧光仪对高温处理下甜玉米光合作用进行分析,结果显示26.5℃、36℃、41℃下Fm、Fv/Fm、Fv/F0都呈现了逐渐减小趋势。综合表现较好的品种为鲜美1,穗甜202,夏威夷,是耐热性较好的材料;表现较差的为FZ15,C5,对高温较为敏感。 4.以甜玉米总RNA为模板合成cDNA,对位于甜玉米第4染色体水通道蛋白基因ZM-AQPIP1-5进行克隆,测序结果表明该基因长1222bp。通过NCBI在线核酸对比分析发现与小米、高梁、水稻、毛竹的同源性分别达到了93%、92%、90%、90%。同时与香根草、大麦、多年生黑麦草、小麦也有较高的同源性。 5.以甜玉米幼穗、叶片为材料,以cDNA为模板利用RT-PCR方法对ZM-AQPIP1-5基因进行半定量分析发现,处理条件(36℃)下表达量高于对照组(26.5℃),幼穗中表达量高于叶片。