背景:骨质疏松症以易发生脆性骨折为主要特点。骨保护素（OPG）作为骨形成标志物,主要通过OPG/RANK/RANKL系统发挥抑制破骨细胞分化和活性的作用。OPG还被认为存在许多骨外作用,如参与心血管系统、免疫系统疾病和抗肿瘤作用等,但仍有待确定。此外,OPG在代谢性疾病中的作用也尚不清楚,有研究认为,OPG可保护胰岛β细胞,其在糖尿病和糖尿病并发症中的作用机制有待进一步探索,甚至可能成为新的生物标志物或治疗靶点。骨质疏松性骨折是严重影响患者生活质量和生命安全的并发症,具有多重危险因素,其中甲状腺功能异常和2型糖尿病肾脏病可能因共病状态加重其风险,如何改善共病状态、延缓任一疾病的进展是亟需解决的问题。此外,WHO推荐应用骨折风险预测工具（FRAX）来预测10年发生主要骨质疏松性骨折和髋部骨折的概率,但因纳入的临床因素有限,中国人群的骨折风险可能被低估,故在大样本人群中探讨FRAX的应用特点、适用人群及其他因素（如骨代谢生化指标）对其的影响,具有一定意义。本论文先后通过人群血清学研究和动物基础实验探索OPG在2型糖尿病肾脏病领域的作用机制;讨论甲状腺功能异常和2型糖尿病肾脏病之间是否存在有利于延缓疾病进展的相互作用;并对FRAX在自然人群中的适用特点和其评分与骨代谢生化指标的相关性进行分析。通过本文的四部分内容,旨在为骨在代谢性疾病中的内分泌作用提供新的依据,为指导骨质疏松性骨折的早期干预提供新的思路和理论基础。第一部分:2型糖尿病患者OPG水平与肾脏病及肾脏病进展风险的相关性研究目的:（1）分析2型糖尿病患者血清OPG水平与肾脏病的相关性。（2）分析2型糖尿病患者血清OPG水平与肾脏病进展风险的相关性。方法:（1）研究对象来源于2018年2月至2020年11月在南昌市第三医院内分泌代谢科常规住院的2型糖尿病患者,经充分知情同意后纳入研究。（2）病史采集、体格检查、血尿检测。（3）以eGFR进行CKD分期（G1-G5）,以UACR进行白蛋白尿分组（正常、微量白蛋白尿、大量白蛋白尿）,以肾脏病改善全球预后指南（KDIGO）建议进行CKD进展风险分组（低风险、中风险、高风险和极高风险）。结果:（1）484名2型糖尿病患者纳入分析,OPG平均水平为976.49±589.10 pg/ml。（2）OPG水平随着白蛋白尿和CKD进展风险的加重而逐渐降低;没有发现OPG水平在CKD分期分组中存在差异。（3）校正多种混杂因素后,OPG水平每升高1个SD,可降低大量白蛋白尿的患病风险和肾脏病进展高风险达36%和29%;没有发现OPG和CKD分期的相关性。结论:2型糖尿病患者中,血清骨保护素（OPG）水平升高是白蛋白尿和CKD进展高风险的相关保护因素。第二部分:OPG通过拮抗RANK/NF-κB信号通路和调节自噬在糖尿病肾脏病中的作用目的:（1）通过动物实验验证OPG对糖尿病肾脏病的作用。（2）解析OPG作用于糖尿病肾脏病可能的机制。方法:（1）4只db/m小鼠为正常对照组,20只造模成功的db/db小鼠按1:1:1:1:1随机分为DKD模型组、OPG过表达组、OPG干扰（shOPG）组、OPG过表达空载（OPGNC）组和OPG干扰空载（shOPGNC）组。（2）血清学检测:ELISA法检测各组OPG水平,血生化检测血糖、BUN和SCr水平。（3）病理学检查:各组肾组织切片分别用HE染色进行一般形态学分析,用PAS染色评估肾小球系膜基质和基底膜,用Masson染色评估胶原沉积和间质病变。（4）TUNEL法检测各组肾脏细胞凋亡的比例。（5）蛋白质检测:实时荧光定量PCR和Western blot用于检测肾组织中RANK/NF-κB通路相关蛋白（RANKL、TRAF6、P62和P65）和自噬相关蛋白（LC3B、Beclin-1 和 Atg5）的表达水平。结果:（1）所有DKD组血清OPG水平较正常对照组降低,OPG过表达组OPG水平较DKD模型组升高。（2）对比DKD模型组,OPG过表达组的BUN和SCr水平降低,shOPG组的SCr水平升高。（3）OPG过表达组的肾脏病理变化较DKD模型组改善,表现为系膜细胞轻度增生,系膜基质的增加扩张减轻,基底膜增厚减轻,小管上皮细胞空泡变性程度有所减少,小球与小管间隙胶原纤维明显减少。（4）对比DKD模型组,OPG过表达组的细胞凋亡减少,shOPG组明显增加。（5）对比DKD模型组,OPG过表达组RANK/NF-κB通路相关蛋白的表达降低,自噬相关蛋白的表达升高;shOPG组相反。结论:（1）在糖尿病肾脏病中,OPG过表达可保护肾脏,改善肾脏结局。（2）OPG可能通过拮抗RANK/NF-κB信号通路和调节细胞自噬发挥肾脏保护作用。第三部分:2型糖尿病患者甲状腺激素水平与肾脏病进展风险的相关性研究目的:（1）探讨甲状腺激素与2型糖尿病肾脏病（DKD）进展风险之间的相关性。（2）在不同性别中获取甲状腺激素评估DKD进展高风险的切点。方法:（1）研究对象来源于2018年2月至2020年11月在南昌市第三医院内分泌代谢科常规住院的2型糖尿病患者,经充分知情同意后纳入研究。（2）病史采集、体格检查、血尿检测。（3）DKD 定义为 eGFR＜60ml/min/1.73m2和/或 UACR≥30mg/g,研究人群分为DKD组和无DKD组。以肾脏病改善全球预后指南（KDIGO）建议定义CKD进展低风险、中风险、高风险和极高风险。结果:（1）452名2型糖尿病患者纳入分析,188人（41.6%）患有DKD。（2）与无DKD组相比,DKD患者年龄更轻;eGFR、FT3和FT4水平更低;BUN、SCr、UA、LDL-C、UACR 和 TSH 水平更高。（3）DKD患者甲状腺功能异常（包含甲状腺机能亢进、亚临床甲状腺机能亢进、甲状腺机能减退或亚临床甲状腺机能减退）的总体患病率为22.9%,其中亚临床甲状腺功能减退症的患病率高达19.7%,均与无DKD组（17.5%和9.5%）有显著差异。（4）FT3水平随白蛋白尿、CKD分期和KDIGO风险的严重程度加剧而降低;FT4水平随着CKD分期的恶化而降低;TSH水平随着KDIGO分类的风险增加而升高。（5）FT3和FT4水平与SCr和UACR均呈负相关,与eGFR均呈正相关;相反,TSH水平与UACR呈正相关,与eGFR呈负相关。（6）校正多种混杂因素后,FT3水平升高显著降低DKD的患病风险达42%,降低DKD进展的风险达35%-50%;未观察到FT4和TSH的影响。（7）男性FT3≤4.30pmol/L增加了 DKD进展的高或极高风险达2.66倍,女性FT3≤3.99pmol/L增加了 DKD进展的中风险达1.37倍,增加了高或极高风险达6.23倍。结论:（1）FT3水平降低是DKD患病和DKD进展的相关危险因素。（2）低FT3水平（男性低于4.30 pmol/L、女性低于3.99 pmol/L）将大大增加2型糖尿病患者肾脏病进展的风险。第四部分:骨折风险预测工具（FRAX）的临床应用研究目的:（1）分析骨折风险预测工具（FRAX）在自然人群中的特点。（2）对比FRAX工具在城区与城乡结合部居民中应用的差异。（3）探讨骨代谢生化指标对FRAX的影响。方法:（1）于2018年6月分别在南昌市西湖区（城区）和青山湖区（城乡结合部）开展流行病学调查,纳入40岁及以上居民,研究对象均签署知情同意书。现场完成体格检查、问卷调查和口服葡萄糖耐量试验。（2）血标本完成血生化（FBG、OGTT-2hBG、肾功能、血脂）、骨代谢生化指标（Ca、P、25-OH-VD、OC、β-CTX）等检测。（3）研究对象至南昌市第三医院完成股骨颈和腰椎1-4骨密度检测。互联网访问 http://www.sheffield.ac.uk/FRAX/?lang=chs,计算 FRAX 评分（10 年内主要骨质疏松性骨折和髋部骨折的概率）。结果:（1）共1051名研究对象纳入本研究,其中城区553人,城乡结合部498人。平均L1-L4骨密度0.78±0.15g/cm2,股骨颈骨密度0.77±0.13 g/cm2;10年内主要骨质疏松性骨折概率3.4（2.3-5.4）%,髋部骨折概率0.6（0.3-1.5）%。（2）城区居民比城乡结合部居民腰围更大,目前饮酒人数占比更高,FBG、血脂水平更高;类风湿关节炎患病人数和规律运动人数占比更低,规律运动时间更短。（3）对比城区居民,城乡结合部居民的股骨颈骨密度更低;FRAX骨折风险评分普遍更高;血Ca、P、β-CTX更低,25-OH-VD更高。（4）全体研究对象的FRAX评分主要与腰椎和股骨颈骨密度、Ca呈负相关;城区居民主要与股骨颈骨密度呈负相关;城乡结合部主要与腰椎和股骨颈骨密度呈负相关;均与β-CTX呈正相关。（5）在全体研究对象和城区、城乡结合部人群中,β-CTX水平升高均显著增加10年内主要骨质疏松性骨折高概率的风险达2.7倍、4.9倍和31倍;均显著增加10年内髋部骨折高概率的风险达3.5倍、6.4倍和19.5倍。结论:（1）FRAX在自然人群中是一项值得推广的临床工具。（2）城乡结合部人群的10年内骨折概率高,需加强骨质疏松症及其骨折的早期筛查和干预。（3）除与骨密度相关外,β-CTX水平升高可显著增加骨折高概率的风险,尤其是城乡结合部人群,提示需要将FRAX和骨密度、骨代谢生化指标结合起来进行更理想的骨折风险预测。