乳杆菌JH23代谢产物中单胺氧化酶抑制剂的分离纯化

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guorui146105
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
由单胺氧化酶(MAO)活性异常增高导致的神经衰退类疾病如帕金森氏病等,已逐渐成为人类健康的巨大威胁。因此,MAO抑制剂因其在此类神经系统疾病中的治疗作用也越来越受到重视,纯天然、低毒副作用的MAO抑制剂已成为研究的焦点。在已报道的天然来源的MAO抑制剂,大多数都以植物作为来源,也有从霉菌的发酵产物中获取的,但尚未见关于乳酸菌代谢产物对MAO抑制作用的报道。干酪乳杆菌JH23是一株在前期研究中获得的具有抑制MAO活性的乳酸菌,本文对其具有活性的组分进行了分离和化学成分分析,为今后乳酸菌体内抗衰老的研究以及神经衰退疾病药物的开发提供参考。(1)将雄性老龄大鼠肝脏匀浆,利用差速离心法获得MAO,测定粗酶液的蛋白含量和酶活,计算单位质量蛋白的酶活。利用选择性抑制剂的作用,分别制备MAO-A和MAO-B。(2)用单因素法分析了不同培养时间、培养温度和接种量对Lactobacillus caseiJH23代谢产物抑制MAO效果的影响,并通过响应面分析法确定Lactobacillus caseiJH23产MAO抑制剂的优化工艺参数:培养温度32.5℃,培养时间21h,接种量3.5%,在此条件下测得发酵液对MAO的抑制率为71.53%。(3)通过对比不同有机溶剂的提取效果,选择乙酸乙酯作为提取溶剂。发酵液提取后获得的有机相,采用蒸馏水反复洗涤,以去除易溶于脂相而难溶于水相的杂质,合并水相部分。水相成分经处理冻干后,其对MAO-A和MAO-B的IC50值分别为1.69mg/ml和4.93mg/ml,与最初发酵液相比纯化了3.98倍。(4)经过名义分子截留量为1KD的膜透析后,发现具有MAO抑制活性的组分分子量小于1000D。因此选用Sephadex G-15分离水相组分,将通过凝胶柱分离的到的组分记作W1,W1对MAO-A和MAO-B的IC50值分别为0.327mg/ml和1.13mg/ml,比上柱前约纯化了4倍。(5)W1经过高效液相色谱,C18柱进一步纯化,将纯化得到的有效组分用红外(IR)、核磁共振(NMR)和MS-MS等方法进行结构分析,根据结果初步判断此物质为琥珀酸。再根据琥珀酸标准品的液质图谱对比,确定活性物质为琥珀酸。
其他文献
目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3
传统的软件工程方法学曾经给软件产业带来巨大进步,部分缓解了软件危机,但是并不适合大型软件产品的开发。自20世纪80年代中期起,人们开始注重面向对象的分析和设计研究,逐步
<正> 亚历山大病(Alexander’s disease,AXD)也曾被称为纤维蛋白样白质营养不良脑病,是一种由于星型胶质细胞功能异常导致的脑白质营养不良性疾病,属于中枢神经系统退行性病
排放扩容器是湿蒸汽发生器附属的必备设备之一,其运行产生噪声是注汽站噪声的主要部分,噪声峰值能达到130dB,对其操作人员的健康伤害很大。针对这种情况研究改造出了新型的排放
CRH3型动车组塞拉门是旅客进出车组的重要途径,其特点多唇密封,多重锁闭,高强度复合门扇,具有很高的密封性能,可降低客室噪声,有很强的隔热、防火功能,使用寿命长,起着保护旅
联合国人权机制对于制定和实施国际人权法发挥着重要作用,同时也受到政治化、资源匮乏和制度设计缺陷等问题的困扰。联合国人权机制的整合是完善该机制的重要途径,体现了人权
资源税费改革和营改增是目前我国税费改革的重点,资源税与增值税作为煤炭企业的主要税种,新政策的出台必然会对煤炭企业的税负造成重要影响。陕西煤业作为陕西省第一大煤炭企
【正】 研究与分析女顾客的心理活动,了解她们的消费行为,更好地当好顾客的参谋,这是扩大商品销售,提高企业与商店竞争能力的重要条件,也是社会主义商业工作者要学习的一个重
《儒林外史》是一面映照18世纪封建社会的镜子。牛浦作为一个市井小民,向我们揭示着封建社会中小人物的生存境况和生活态度,更能反映出当时社会的病态。作者不仅向我们展示了
语文课程是母语教育,是在儿童母语口语业已熟练的前提下起步的。两者同体,遵循着相同的运动规律。据此学理,文章联系古今语文教育的实际,通过对母语个体发展中的层级性、影响