钩端螺旋体病以黄疸、肝肾功能障碍为特征。犬自然感染钩端螺旋体病的病例时常发生,即便钩端螺旋体疫苗免疫后也会发病。由于钩端螺旋体病早期感染症状不明显,且未能及时的确诊和治疗,部分感染者可迅速发展成危重症,死亡率极高。钩端螺旋体病主要通过犬接触有病原的尿液和水源进行感染的,钩端螺旋体在潮湿的环境中可以存活数月之久,且毒力不会降低,传染性很强。随着犬养殖业的发展及家庭饲养宠物犬的增加,犬感染钩端螺旋体病的数量逐渐上升,给养犬行业造成了重大困扰。本实验通过对江西地区钩端螺旋体疫区的犬养殖点进行储存宿主褐家鼠的捕捉,及临床疑似和确诊钩端螺旋体病的犬进行钩端螺旋体的分离培养,并鉴定菌型,为建立SPF犬钩端螺旋体病发病模型提供菌源。通过PCR、MLST等方法确定分离到的钩端螺旋体的菌型,并用分离菌对金黄地鼠进行感染研究其致病性。针对分离到的钩端螺旋体的血清型,设计引物,构建钩端螺旋体PCR诊断方法。通过对攻毒途径和剂量的摸索,最终用2.5×1010条钩端螺旋体的剂量腹腔注射感染SPF实验犬,建立钩端螺旋体病的感染模型。结果从210份样品中成功分离纯化出16株钩端螺旋体菌株,鉴定血清型为澳洲群澳洲型,金黄地鼠感染死亡说明具有致病性,成功设计出一对引物,目的片段大小为278bp,摸索退火温度55℃为佳,对反应体系进行优化,最低检测浓度为1×10-5 ng/μl,构建了钩端螺旋体PCR诊断方法。通过对感染SPF实验犬的血常规、生化指标、抗体效价及剖解后的病理变化结果的分析和观察,确定SPF实验犬感染了钩端螺旋体病。成功建立了 SPF犬钩端螺旋体病发病模型。