砧木子叶源生长素影响自嫁西瓜愈合的机制研究

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嫁接作为一种重要的农艺措施,可增强西瓜等园艺作物抵抗生物和非生物逆境的能力,提高资源利用效率。砧木子叶在西瓜嫁接中有着重要作用,是生长素合成的重要部位,但砧木子叶源生长素对嫁接愈合的影响机制尚未明晰。本研究以自嫁西瓜(97103/97103)为研究对象,探究砧木子叶源生长素对嫁接愈合的影响机制。同时,维管束的连通被认为是嫁接愈合成功的标志,因此针对监测瓜类作物嫁接维管重连方法进行研究。研究结果如下:1.与自嫁西瓜保留单片砧木子叶相比,完全去除砧木子叶后,嫁接愈合延迟,表现为接穗新叶生长减缓,接穗鲜重增长减慢,物理粘连力减弱,细胞增殖、愈伤组织形成减少,以及木质部、韧皮部重新连通延迟。2.通过对嫁接愈合过程中砧木子叶、砧木及接穗近嫁接愈合面端茎段生长素含量动态变化分析,发现砧木子叶生长素含量在早期嫁接愈合过程中降低。同时,去除砧木子叶后,对接穗茎段生长素含量无明显影响,砧木茎段生长素含量减少。这说明了砧木茎段中的生长素有很大一部分可能来自于砧木子叶中。3.针对愈伤组织形成减少以及砧木茎段生长素含量降低的现象,对细胞分裂及生长素极性运输相关基因进行表达分析。我们发现去除砧木子叶后,细胞分裂及生长素极性运输相关基因表达量均下调,说明砧木子叶源生长素对西瓜嫁接愈合很重要。4.通过外源施加生长素后,促进了自嫁西瓜砧木无子叶处理嫁接苗生长,愈伤组织的形成,以及木质部、韧皮部的重新连通。有力支持了砧木子叶源生长素能促进嫁接愈合过程。5.我们研究发现,西瓜中的木质素在GFP下表现出强烈的自荧光,这使得蓝光激发的荧光示踪剂(FTs),如5(6)-羧基荧光素二乙酸酯(CFDA)不适合测定西瓜的维管束连通性。相比之下,Esculin和Acid fuschin分别被证明是监测自嫁接西瓜韧皮部和木质部连通性的有效FTs。此外,将Esculin与Acid fuschin联合应用可以同时监测单个嫁接植株的韧皮部和木质部连通性。该方法还适用于研究黄瓜和甜瓜韧皮部和木质部的重新连接。综上所述,我们发现砧木子叶源生长素通过影响愈伤组织形成、木质部及韧皮部的重连,从而影响自嫁西瓜嫁接愈合过程。同时,我们开发了一种方便、快捷、准确的同时监测瓜类作物嫁接过程木质部及韧皮部连通的新方法。
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