第一章TRIM22通过NOD2/NF-KB信号通路抑制子宫内膜癌进展并改善预后目的:通过体外、体内两方面实验,研究TRIM22作为免疫炎症相关蛋白,对EnC发生发展的调控作用,旨在指导临床治疗及预测预后。方法:临床上收集EnC组织74例、正常子宫内膜组织(NET)25例,采用免疫组织化学方法检测上述两种组织中TRIM22的表达。收取8对EnC组织及相应的癌旁组织进行western blot检测,比较两者中TRIM22的表达情况。体外实验通过Edu、Transwell、细胞周期实验,研究TRIM22对EnC细胞的增殖能力、侵袭、迁移、细胞G1期或者S期的影响;通过对EnC细胞稳定转染慢病毒过表达TRIM22和瞬时转染shRNA质粒降表达TRIM22,研究过表达或降表达TRIM22对EnC细胞的迁移、侵袭、增殖、细胞G1期或者S期的影响;采用western blot、Co-IP、免疫荧光双标、核质分离等实验方法,验证TRIM22通过NOD2/NF-κB信号轴有效抑制EnC的进展。体内实验通过荷瘤小鼠体内异体移植瘤研究TRIM22对EnC发生发展的影响。结果:免疫组织化学和western blot结果显示EnC组织中TRIM22的表达量均低于NET及癌旁组织。过表达TRIM22可抑制EnC细胞的迁移、侵袭、增殖能力和抑制细胞周期活动(细胞G1期受阻滞,进入S期的细胞明显减少);降表达TRIM22则反之。组织免疫荧光双标和免疫共沉淀实验验证了 TRIM22与NOD2之间存在着共定位和直接的相互作用关系;TRIM22的过表达引起NOD2的表达增加,从而引起下游NF-κB通路的关键蛋白NF-κB-P65、IκBα表达升高,及相应的磷酸化蛋白pNF-κB-P65、pIκBα表达降低;同时蛋白核质分离实验验证了 TRIM22过表达抑制NF-κB-P65从细胞质向细胞核转移;EdU增殖实验、Transwell验证了降表达NF-κB-P65后,过表达TRIM22的EnC细胞的增殖、迁移、侵袭能力得到了恢复;从而揭示了 TRIM22通过NOD2/NF-κB信号通路有效抑制EnC的进展。通过体内实验证实了皮下注射TRIM22过表达的EnC细胞的小鼠皮下形成的异体移植瘤体积明显小于对照组;小鼠移植瘤组织免疫组织化学结果发现过表达TRIM22的小鼠肿块组织Ki67表达降低,小鼠肿块组织HE染色证实是EnC组织病理镜下表现,从而揭示TRIM22抑制小鼠体内异种移植瘤生长。Kaplan-Meier生存分析显示TRIM22表达高于平均数的患者的生存时间明显增高,从而揭示了TRIM22有可能是EnC预后的重要预测因子及治疗靶点。结论:本研究揭示了 TRIM22通过NOD2/NF-κB信号通路有效抑制EnC的进展,TRIM22发挥了一种新的抑制性调节作用。TRIM22可能是EnC预后的重要预测因子及治疗的靶点。第二章子宫内膜不典型增生症孕激素治疗有效性与TRIM22表达改变相关目的:研究子宫内膜不典型增生症(AEH)患者高效Progestin治疗过程中,Progestin治疗的有效性与TRIM22表达变化的关系,及这种改变与Progestin治疗的关系。方法:通过免疫组织化学方法检测AEH患者在高效Progestin治疗前后子宫内膜组织TRIM22的表达情况的差异;通过western blot检测EnC细胞经Progestin处理后TRIM22的表达情况;通过CCK8增殖实验检测TRIM22对EnC细胞增殖能力的影响。结果:在Progestin治疗有效组,TRIM22的表达在治疗后升高,治疗前后差异有统计学意义(P=0.0003);Progestin治疗无效组,TRIM22的表达在治疗前后无明显差异(P=0.6349)。经Progestin处理PR阳性的EnC细胞Ishikawa,TRIM22的表达随Progestin浓度的升高呈剂量依赖性的升高,其增殖能力反而降低。结论:Progestin治疗AEH的有效性与TRIM22表达升高相关,Progestin可能通过TRIM22抑制AEH腺体腺上皮细胞的增殖来逆转AEH,预防AEH进展为 EnC。