陕西省四种不同寄主上二斑叶螨体内Wolbachia菌wsp基因的克隆和序列分析

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kwannew
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Wolbachia是存在于节肢动物体内的一类呈母系遗传的细胞内共生细菌,可以通过卵的细胞质传播并参与调控寄主的多种生殖活动,如诱导孤雌生殖、细胞质不亲和等。Wolbachia可能是自然界中分布最广、丰度最大的共生细菌类群。wsp基因是一种编码Wolbachia表面蛋白的基因,相对于16SrDNA、ftsZ基因等DNA区段,wsp基因进化速度更快,可以更好地揭示Wolbachia与其寄主之间的相互关系。二斑叶螨(Tetranychus urticae Koch)分布范围广,寄主植物多。在陕西果区近年来由于农药的大量使用和使用不当,其抗性问题使得其成为果树上的主要害虫。所造成的危害比其它农作物害虫更严重。而近年的研究证明,昆虫的孤雌生殖可能与其体内的共生微生物关系密切,所以利用共生菌Wolbachia诱导的异常生殖行为,如孤雌生殖,雄性化等,实现种群替代,也就是将现有的种群替换为同物种中比原来种群危害小的另一种群,也许是更加有效地防止叶螨科害螨的方法之一。特别是近来来提倡的无公害优质苹果的生产技术的应用,采用共生菌防止果区二斑叶螨是做到真正的无公害生产的可行途径。本文采用Wolbachia的通用引物对寄生在桃树、枣树、苹果、黄堇上的二斑叶螨体内的Wolbachia经行了检测并对其wsp基因进行PCR扩增和测序,其次对测序结果利用DNAMAN6软件在Phylogenetic tree Observed Divergency模型下,各个分支的Bootstrap置信度用1000次自导复制来评价进行对测序结果经行同源性比较和基因特征分析。结果表明:在这四种寄主上的二斑叶螨均被Wolbachia感染;扩增出的片段大小为596bp。其中苹果和桃树上二斑叶螨体内感染的Wolbachia同源性最高达100%;黄堇和苹果的同源性最低达99.2%。而且经过系统发育分析发现它们全部与B组的Ori亚群的Wolbachia株十分相近或相同。总体来说,他们的簇类关系上呈平行分布,没有明显的不同寄主上的差异。
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