广西大王岭和大明山保护区苏云金芽孢杆菌的收鉴及新杀虫基因cry40Da1的克隆

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jzymw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本课题系统收集了从广西大王岭和大明山两个自然保护区共采集到土样264份,共分离出597株芽孢杆菌,通过光学和电子显微镜检观察,16株分离株观察到伴胞晶体蛋白,初步确定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt),出菌率为6.06%。在16株Bt分离株中,有4株在芽孢形成过程中能产菱形晶体蛋白,其余12株能产圆形和其他形状的晶体蛋白。利用PCR-RFLP方法和SDS-PAGE方法对16株Bt分离菌进行了蛋白和基因型的鉴定,结果表明,16株分离株中,4株含有crylAc基因,表达约130 kDa的晶体蛋白,其中含有cry30基因和cry40基因的菌株分别1株和3株,表达大约75kDa的晶体蛋白;另外8株Bt菌株表达蛋白大小不一,其基因型尚不能确定,有待进一步分析。生物测定表明,产菱形晶体含有crylAc基因的4株Bt分离株对鳞翅目小菜夜蛾幼虫有很强的毒杀活性,而其它分离株对小菜夜蛾没有毒杀活性。   苏云金芽孢杆菌分离株S2096-2是从中国广西大王岭自然保护区采集的土壤样品中分离得到的,伴随芽孢形成能产生椭圆形伴胞晶体。经过PCR-RFLP系统鉴定,它含有cry40基因,对其进行亚克隆和测序,序列表明该基因编码区(ORF)为1977bp,其编码658个氨基酸,分子量为75kDa,对该蛋白的空间结构进行预测表明该蛋白由具有不同功能的三个结构域有规律的结合在一起。初步的生物活性测定表明该蛋白对蚊虫幼虫的具有很强的杀虫活性,该cry40基因已在GenBank基因库中注册,基因登录号为EU596478,并被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为cry40Da1。
其他文献
梨子坪混凝土面板堆石坝坝高77.5m,属于中等高度坝。该坝坝基岩体倾角平缓,卸荷裂隙发育。坝基开挖和防渗处理是混凝土面板堆石坝设计的重要环节,对坝体的稳定、沉降、变形、防
水闸主要用于对水的调控,可以进行拦挡来水和排泄弃水,在保供水、防洪涝、挡海潮、灌溉调水、水电站发电与水力运输等上显现出重大作用。我国建成流量大于5m3/s的水闸有10余万
洪水灾害,是世界上最为严重的自然灾害之一,严重影响人民生活安全。随着对洪水研究的不断深入,洪水预报作为重要的防洪减灾的非工程措施,能够有效的帮助人们防御洪水,减少洪灾损失
压力管道是水电站输水建筑物的重要组成部分,起到将水引入水电站厂房的作用。然而在长距离的输水工程中,往往采用集中供水或分组供水的方式,此时管道的分流部位就要设置岔管。月
摘要:本研究采用个案跟踪的方式,对名班主任工作室四名成员的专业成长进行个案研究,认为名工作室通过专家引领、同伴互助、课题研究、自我反思促进了名班主任的专业成长。  关键词:专业成长共同体;名班主任工作室;班主任成长;个案研究  中图分类号:G635.1 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)03-0060  近年来,广东省及各市相继成立了中小学名班主任工作室。教育行政部门希望通过