目的：观察肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)联合X射线对三种不同分化程度的人食管癌细胞株TE 13(低分化鳞癌)、KYSE 140(中分化鳞癌)和SEG 1(高分化腺癌)的生长抑制及放射治疗中的增敏效应,探讨TNF-α联合X射线治疗对食管癌放疗增敏作用的机制,为其在食管癌临床治疗的应用提供一定的理论与实验基础。方法：三种不同分化程度的人食管癌细胞株(TE 13, KYSE 140和SEG 1)培养于含10%胎牛血清的RMPI-1640培养基中。rhTNF-α体外作用于这三种食管癌细胞株,药物浓度分别为100 IU/ml,200 IU/ml,400 IU/ml,1200 IU/ml,1600 IU/ml,3200 IU/ml六个梯度,根据公式计算出IC50,采用此浓度作为实验作用浓度。将培养至对数生长期的三种人食管癌细胞分别分为四组：对照组,单独rhTNF-α作用组,单独X射线照射作用组和rhTNF-α联合X射线照射作用组,分别培养12 h,24 h,48 h,72 h,然后采用MTT法检测吸光度(OD值),根据结果绘制细胞生长曲线。采用同样的分组方法,将以上三种人食管癌细胞株培养24 h,经处理后用流式细胞仪分别检测上述三种细胞各组的凋亡情况。用克隆形成试验检测经rhTNF-α处理后三种细胞的细胞存活分数和克隆形成率,并计算放疗增敏比。通过Western blot方法分别检测三种人食管癌细胞对照组和实验组的放疗增敏相关蛋白NF-κB和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达效应。结果：1、细胞生长抑制效应：细胞增殖实验结果显示,TE13, KYSE 140和SEG 1三种人食管癌细胞株的半数致死浓度分别为400 IU/ml,400 IU/ml,1200 IU/ml. MTT实验结果表明,半数致死浓度的rhTNF-α处理后,各组细胞的抑制率随时间的增加而增加,24 h后抑制程度逐渐变缓。rhTNF-α对这三种细胞生长有一定的抑制作用,但统计学处理没有意义,而rhTNF-α联合X射线照射作用组,TE13, KYSE 140和SEG 1三种细胞的生长抑制抑制率为0.388±0.026,0.536±0.016,0.263±0.061,分别与其对应的对照组(0.129±0.086,0.140±0.086,0.096±0.066)、单独rhTNF-α作用组(0.214士0.126,0.209±0.0240.129±0.077)和单独X射线照射作用组(0.158±0.109,0.314±0.099,0.177+0.109)相比有显著差异(P<0.05)。2、流式细胞术检测细胞凋亡效应：单独rhTNF-α作用组、单独X射线照射作用组的细胞凋亡率均高于对照组,而rhTNF-α联合X射线照射作用组的细胞凋亡率明显高于其他三组(P<0.05)。 rhTNF-a联合X射线照射对TE13, KYSE140和SEG 1三种不同分化程度的人食管癌细胞凋亡均有协同作用。3、放疗增敏及凋亡相关蛋白表达：Western blot结果证明,与对照组相比,单独rhTNF-α作用组、单独X射线照射作用组和rhTNF-α联合X射线照射作用组的NF-κB蛋白含量减少,但rhTNF-α联合X射线照射作用组减少程度最大。蛋白Caspase-3的含量均增加,rhTNF-α联合X射线照射作用组增加程度最大。rhTNF-α联合X射线照射作用前,三种细胞NF-κB蛋白含量相差不大,处理后,SEG 1的NF-κB蛋白含量较其他两种细胞减少。结论：注射用重组改构人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)对TE 13, KYSE 140和SEG 1三种人食管癌细胞株的生长抑制作用不明显,与X射线联合应用后,抑制细胞生长效应明显增加,具有放疗增敏作用,其机制可能是通过Caspase途径增强Caspase-3蛋白的表达,诱导细胞发生凋亡来实现的,从而增加TE13, KYSE 140和SEG 1三种人食管癌细胞株对X射线放射治疗的敏感性,增强放射治疗的效果。