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目的:本课题通过对APP/PS1双转基因小鼠行双侧卵巢切除术建立绝经模型,(1)探讨双侧卵巢切除后不同时间段对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)痴呆模型小鼠认知记忆功能及自噬的影响。(2)探讨植物雌激素-甘草素对去势1周APP/PS1双转基因小鼠认知记忆功能及自噬的作用,为绝经女性AD患者的治疗提供新的线索。方法:1、第一部分:建立稳定可靠的小鼠绝经(双侧卵巢切除,Bilateral ovariectomy,OVX)模型:将3月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠分别行双侧卵巢切除术和假手术,同龄C57作为正常对照。术后1周、1月、3月运用Morris水迷宫进行行为学检测,并分别称量小鼠子宫重量,免疫组化检测老年斑的变化,ELISA检测Aβ40、Aβ42水平,Western blot检测Beclin1、Lc3、P62的蛋白水平变化。2、第二部分:观察甘草素(Liquirtigenin,LG)对去势1周APP/PS1双转基因小鼠作用:(1)将3月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠随机分为以下四组:假手术+试剂对照组(sham)、双侧卵巢切除+试剂对照组(OVX)、双侧卵巢切除+甘草素组(OVX+LG)和双侧卵巢切除+雌二醇(17β-estradiol,e2)组(ovx+e2);(2)模型建立1周后,各组给予相应试剂或药物处理,共处理90天;(3)morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力;(4)称量子宫重量;(5)免疫组化和甲硫素染色检测小鼠脑内老年斑沉积;(6)elisa检测脑内aβ含量;(7)采用westernblot检测erα、erβ、beclin1、lc3、p62蛋白表达情况。结果:第一部分结果:双侧卵巢切除后1周对ad小鼠空间学习能力的影响无统计学差异,双侧卵巢切除1月、3月后,小鼠出现空间学习记忆能力减退。双侧卵巢切除会使小鼠子宫萎缩,重量减轻。双侧卵巢切除后1周,app/ps1双转基因小鼠脑内老年斑、aβ均没有明显变化;手术后1月,可观察到老年斑数量和斑块面积均大于假手术组,aβ40变化无统计学差异,aβ40显著增多;wb检测自噬相关蛋白水平,可看到beclin1随着手术时间延长呈不断下降趋势;lc3手术后一周增加,术后1月、3月呈下降趋势;p62在术后一周无明显差异,术后1月、3月呈升高趋势。第二部分结果:甘草素治疗3月后,morris水迷宫实验显示,甘草素治疗组小鼠空间学习能力提高;甘草素治疗对子宫的影响无统计学差异,e2治疗使子宫重量增加;甘草素治疗与e2治疗一样均能使老年斑、aβ减少,且两组间无统计学差异;甘草素治疗上调erβ作用显著,而e2治疗均能显著上调erα、erβ;甘草素、e2治疗均能提高beclin1、lc3蛋白水平,降低p62水平。结论:1、卵巢切除,性激素水平下降,会影响AD小鼠空间学习记忆能力,加重AD老年斑、Aβ沉积,性激素缺乏越久,表现越明显,并且这些变化可能与自噬调节相关;2、甘草素能够改善去势APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆及空间认知能力;3、甘草素对去势APP/PS1双转基因小鼠对子宫的影响比E2作用小,表明甘草素对子宫的副作用更小;4、甘草素治疗减轻去势AD小鼠脑内老年斑沉积,这可能与甘草素上调ERβ,并调节自噬有关。