小麦加工品质电泳检测评价体系研究

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小麦蛋白质对小麦加工品质具有重要作用。迄今为止,人们利用不同的蛋白质分离提纯方法,将小麦蛋白质分解成不同的组分,并对各个组分进行了大量的研究。但由于大多数蛋白质分级方法都是以传统的 Osborne分级法为基础,不同组分间存在严重相互重叠、相互污染的现象。本研究在 Fu 等(1996)和 Bean(1998)蛋白提取方法的基础上,对面粉细度、提取温度、蛋白酶抑制剂以及正丙醇浓度等方面进行了研究。谷蛋白聚合体亚基的定量采用Alpha innotech 公司的ChemilmagerTM4400型凝胶成像扫描仪,并与 Photoshop7.0 处理软件相结合,研究了稳定的谱带面积测定方法和稳定的灰度获取方法,建立了待测亚基含量的计算公式。在改进的蛋白质分离提纯方法的基础上,建立了快速测定谷蛋白大聚合体含量的分析方法。本试验利用该分离提纯方法在分析大量样本的基础上,对小麦品种的可溶性谷蛋白聚合体及谷蛋白大聚合体进行了系统探讨,研究了各组分的类型、含量与加工品质的关系。主要研究结果如下: 1.建立了一种提取彻底并且蛋白各组分间交叉污染较少,适于谷蛋白聚合体亚基准确定量的提取方法。 2. 研究了稳定的谱带面积测定方法和稳定的灰度获取方法,建立了待测亚基含量的计算公式,表达式为:CX=CSSX/SS *[1+(WS-WX)/(255-WS)]。 3. 建立了快速测定谷蛋白大聚合体含量的分析方法:用 3.1.8 节中的提取方法首先进行谷蛋白大聚合体的提取,然后用酚-氯仿(1:1)沉淀蛋白质,烘干,称重。 4. 提高分离胶中 Tris-HCl 的浓度由 0.375mol/L 到 0.55mol/L,增加分 1<WP=8>小麦加工品质电泳检测评价体系研究离胶的缓冲能力,并改变电泳条件,建立了一种适于低分子量谷蛋白亚基准确定量的凝胶电泳方法。5. 建立了可溶性谷蛋白聚合体亚基与加工品质指标的回归模型。6. 建立了谷蛋白大聚合体亚基与加工品质指标的回归模型。7. 建立了谷蛋白大聚合体含量与加工品质指标的回归模型。
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