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病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是指病毒感染引起的弥漫性或局灶性心肌间质的炎性细胞浸润和心肌纤维坏死或退行性变，导致不同程度的心功能障碍和其他系统损害的疾病，是儿童和青少年常见的心血管疾病之一，轻者可无明显症状，重者可致心律失常、充血性心力衰竭、阿-斯综合征、心源性休克，甚至猝死，病情迁延者可发展为扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)，严重危害人体健康。纯化猪心肌球蛋白诱导大鼠产生的实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune myocarditis，EAM)与人类重症心肌炎病理演变过程非常相似，是国内外公认的研究VMC的理想模型。心肌炎的发病机制尚未完全阐明，目前认为T细胞介导的自身免疫在心肌炎的发展过程中起重要作用。白细胞介素37（interleukin37，IL-37）是新发现的抑炎性细胞因子，参与多种炎症性和自身免疫性疾病的发展过程，研究证实IL-37可以抑制过强的免疫反应。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases，MAPK)是细胞内重要的信号转导通路，p38MAPK在此通路中居于核心地位。p38MAPK在机体受到创伤、炎症和生物因素等刺激后激活并移位入细胞核或到细胞内相应部位，调控细胞的增生、坏死及纤维化等多种生理过程。有研究表明，p38MAPK参与了心肌炎的发展过程。CD40/CD40L是一对重要的共刺激信号分子，CD40和CD40L的相互作用在T淋巴细胞的活化及免疫应答始动过程中扮演重要角色。本课题组曾经应用CD40小干扰RNA(CD40 small interfering RNA，CD40siRNA)阻断CD40/CD40L受体-配体轴，可明显改善EAM大鼠的一般状况并减轻其心肌组织损伤。但CD40siRNA对EAM大鼠中IL-37及p38MAPK表达的影响尚未见报道。 目的： 探讨CD40siRNA对EAM大鼠外周血IL-37、心肌组织中p38MAPK表达的影响及意义。 方法： 将32只6～8周健康雄性Lewis大鼠随机分为4组，即正常对照组、EAM组、CD40siRNA干预组（EAM+CD40siRNA组）及siRNA干预组（EAM+siRNA组），每组8只。于实验的第0天和第7天，在EAM组、EAM+CD40siRNA组和EAM+siRNA组大鼠双后肢足垫区注射纯化猪心肌球蛋白诱导产生EAM，正常对照组大鼠在同一部位注射无菌磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）。在实验第7天，EAM+CD40siRNA组与EAM+siRNA组大鼠经尾静脉分别注射CD40siRNA慢病毒载体和siRNA慢病毒载体。实验第21天，麻醉后处死所有大鼠，在光学显微镜下观察大鼠心肌组织病理变化并计算病理积分，采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测大鼠外周血IL-37的表达水平，使用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测大鼠心肌组织p38MAPK mRNA的表达水平，使用免疫组织化学染色、western blot检测大鼠心肌组织磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK，P-p38MAPK)蛋白的表达。 结果： 1.EAM组、EAM+CD40siRNA组及EAM+siRNA组中大鼠的发病率均为100％，无一例死亡。 2.与正常对照组大鼠相比，EAM组、EAM+CD40siRNA组及EAM+siRNA组大鼠体重增加缓慢(P＜0.05)，但EAM+CD40siRNA组大鼠体重增长明显高于EAM组(P＜0.05)，EAM+siRNA组与EAM组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 3.与EAM组相比，EAM+CD40siRNA组大鼠心肌组织病理积分明显降低(P＜0.05)，而EAM+siRNA组与EAM组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。 4.与正常对照组相比，EAM组大鼠外周血IL-37水平明显降低(P＜0.05)。EAM+CD40siRNA组大鼠外周血IL-37水平较EAM组明显升高(P＜0.05)，而EAM+siRNA组与EAM组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 5.EAM大鼠外周血IL-37水平与心肌组织病理积分呈负相关(r=-0.921，P＜0.01)。 6.EAM组大鼠心肌组织中p38MAPK mRNA的表达水平明显高于正常对照组(P＜0.05)，与EAM组相比较，EAM+CD40siRNA组p38MAPK mRNA表达水平明显降低(P＜0.05)。EAM+siRNA组与EAM组大鼠相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 7.免疫组织化学染色显示，与正常对照组相比，EAM组大鼠心肌组织中P-p38MAPK的阳性染色程度明显加深，且阳性细胞率明显升高（P＜0.05），而EAM+CD40siRNA组的染色程度和阳性细胞率明显低于EAM组(P＜0.05)。EAM+siRNA组与EAM组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。 8.与正常对照组相比，EAM组大鼠心肌组织中P-p38MAPK蛋白的表达明显升高(P＜0.05)，而EAM+CD40siRNA组中P-p38MAPK蛋白的表达则明显低于EAM组(P＜0.05)。EAM+siRNA组与EAM组大鼠相比差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论： 1.CD40siRNA能够减轻EAM大鼠的心肌炎症损伤。 2.IL-37参与了EAM的发展过程;外周血IL-37水平与心肌组织病理积分呈负相关，其变化可在一定程度上反映心肌损伤程度;CD40siRNA对EAM大鼠的治疗作用可能与上调IL-37的表达水平有关。 3.p38MAPK参与了EAM的发展过程;CD40siRNA可能通过抑制p38MAPKmRNA的表达及降低p38MAPK蛋白的磷酸化水平发挥对EAM大鼠的治疗作用。