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冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是滋补强壮的名贵中药,核苷类物质为其药效成分之一。本文采用毛细管区带电泳法测定天然冬虫夏草和代用品人工蛹虫草(Cordyceps militaris)中9种核苷类成分的含量,并对冬虫夏草和人工蛹虫草进行了指纹图谱研究。 一、冬虫夏草的内在质量研究 采用单因素考察和均匀设计法U6(63)结合,以腺苷、鸟苷和尿苷含量为指标,优化了冬虫夏草的提取方法;分别考察不同pH和硼砂分离条件对9种对照品分离度的影响。在此基础上,采用均匀设计法U6(64)考察了不同缓冲液对样品提取物分离度的影响,确定毛细管电泳的分离条件为:36mmol·L-1硼砂-15mmol·L-1磷酸二氢钠(pH 9.2),运行电压14.0kV,测定波长254nm,内标物为头胞唑啉钠。9种对照品工作曲线的线性良好,相关系数>0.9992,平均回收率>94.3%,精密度RSD<4.2%(n=5),为冬虫夏草质量评价提供了定性、定量分析的依据,与法定方法结果比较,无显著差异。本研究比较了天然虫草和人工虫草及其制剂、蛹虫草、亚香棒虫草中核苷类含量差异,发现各种间核苷类成分变化不明显,但整个色谱图差异较大。 二、人工蛹虫草的内在质量研究 采用毛细管电泳法研究不同培养基质培养的人工蛹虫草及其不同部位核苷类含量的差异。考察了不同缓冲液对样品分离度的影响,建立了人工蛹虫草中9种核苷类含量的电泳测定方法:背景缓冲液为40mmol·L-1硼砂(用磷酸调pH至9.0),检测波长254nm,运行电压16.0kV,内标物为磷酸氯喹。9种对照品工作曲线线性良好,相关系数>0.9992.平均回收率>93.2%,精密度RSD<4.3%。本文对不同培养方法培养的人工蛹虫草的不同部位进行了 沈阳药科大学硕士论文 摘要研究。结果表明,从色谱图上看人工蛹虫草子实体较为接近冬虫夏草。初步推测人工蛹虫草中腺昔来源于其体内腺瞟吟的昔化。三、虫草与人工蛹虫草指纹图谱的建立 本文在药效成分定量的基础上,采用 CE法对收集的 10个冬虫夏草样品和 8批人工蛹虫草子实体 20%乙醇提取液进行指纹图谱分析。采用“指纹图谱相似度软件”分析,不同来源的冬虫夏草相似度大于SO:不同批次的人工蛹虫草相似度大于75。 回此,本研究为冬虫夏草和人工蛹虫草的内在质量研究建立了新方法。并以9种核昔类成分为指标;研究了冬虫夏草和人工蛹虫草的指纹图谱,对于有效控制其质量,完善其评价标准提供了依据。