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啤酒花(Humulus lupulus Linn.)是酿制啤酒的基本原料之一,它不仅能给予啤酒独特的芳香和清新的苦味,还能改善啤酒的澄清度和稳定性。研究表明啤酒花具有多种生物活性,但对其发挥作用的活性成分仍不清楚。本课题组前期纯化并鉴定了两个啤酒花均一多糖HL70-2和HL90-1,活性测试发现其具有良好的体外促成骨活性。因此,本论文继续研究啤酒花多糖的分离纯化和结构表征,为后续研究啤酒花多糖的抗骨质疏松作用机制和构效关系提供基础。首先用热水和碱液对啤酒花雌花中的多糖进行提取,再用分级醇沉法得到啤酒花四个部位的粗多糖,即HL50、HL70、HL90和HLB,苯酚硫酸法测得它们的糖含量分别为:52.3%、79.8%、49.7%和72.3%。采用Sevage法对粗多糖HL50、HL70和HLB进行脱蛋白,并透析、浓缩、冻干。样品通过DEAE-Cellulose 52阴离子交换柱进行分离,再用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,最终得到八个啤酒花多糖HLP50-1、HLP50-2、HLP70-2-1、HLP70-2-2、HLP70-3、HLBP-2、HLBP-3和HLBP-4。比旋光度法和高效凝胶渗透色谱法验证上述八个多糖均为均一多糖,分子量分别为49.13 kDa、73.25 k Da、11.12 kDa、7.3 k Da、26.48 kDa、6.13 kDa、35.23 kDa和33.12 kDa。利用PMP衍生化法分析上述八个多糖的单糖组成,结合D/L绝对构型确认、红外分析、完全甲基化-GC-MS分析和核磁分析得到这八个多糖的一级结构,结果表明HLP50-1、HLP50-2、HLP70-2-1、HLP70-2-2、HLP70-3、HLBP-2、HLBP-3和HLBP-4均为由多种糖残基形成的杂多糖,且结构均未见报道。利用刚果红实验和扫描电镜分析上述八个多糖的高级结构,刚果红实验显示这八个多糖均没有三股螺旋结构;扫描电镜结果表明这八个多糖的表面形貌各不相同。