HGF/c-Met信号通路与其调控因子MACC1在前列腺癌中的表达研究

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目的:  前列腺癌是泌尿外科老年患者常见的肿瘤之一,近年来其发病率有显著增长的趋势。前列腺癌患者主要的死亡原因是其发生局部浸润、骨转移等情况。c-Met在多种恶性肿瘤组织中存在且过度表达,在结肠癌中发现其调控因子 MACC1也与肿瘤的浸润、转移密切相关,MACC1通过调节c-Met的表达可促进多种恶性肿瘤的侵袭及转移。本实验一采用免疫组织化学法,通过检测前列腺癌组织和前列腺增生组织中c-Met和MACC1的表达情况,将其相关的临床病理情况进行详细分析,从而探讨 c-Met和MACC1与前列腺癌发生、进展及骨转移之间的关系,及其二者在前列腺癌中相关性分析,进而寻找与前列腺癌骨转移有关的早期预测标志。本实验二通过免疫细胞化学及 western blot实验观察前列腺癌不同细胞系(C4-2、LNCAP、PC-3细胞)中c-Met及MACC1的表达,通过其表达差异,推测AR与c-Met、MACC1之间的关系,为雄激素抵抗性前列腺癌寻找新的治疗靶点。  方法:  1.方法:采用免疫组化SV法检测及DAB显色,检测67例前列腺癌组织及30例前列腺增生(BPH)组织中c-Met和MACC1的表达情况,将其相关的临床病理情况进行详细分析。采用免疫细胞化学及western blot实验观察前列腺癌不同细胞系(C4-2、LNCAP、PC-3细胞)中c-Met与MACC1的表达情况。  2.统计学分析:免疫组化结果中所表达的情况,采用χ2检验进行比较分析。采用Spearman等级相关检验分析两者所表达强度的相关性。免疫细胞化学结果采用Image-pro plus图片分析软件及F检验进行比较分析。采用 SPSS19.0对数据进行统计学分析,差异有统计学意义的判断标准:P<0.05。  结果:  1.前列腺癌的c-Met蛋白表达与临床分期、Gleason分级及PSA的数值密切相关(P<0.05),也与根治术后骨转移的发生密切相关(P<0.05);仅Ⅳ期前列腺癌组中c-Met蛋白高表达率较BPH存在差异(P<0.05)。Ⅳ期前列腺癌组仅与Ⅰ~Ⅱ期前列腺癌组比较存在差异(P<0.05)。  2.前列腺癌的MACC1蛋白表达与临床分期、Gleason分级及PSA的数值密切相关(P<0.05),且与根治术后骨转移的发生密切相关(P<0.05);Ⅲ期前列腺癌组和Ⅳ期前列腺癌组中MACCl蛋白高表达率较BPH存在差异(P<0.05),Ⅳ期前列腺癌组与其他两个前列腺癌组比较均存在差异(P<0.05)。  3.前列腺癌中c-Met和MACC1的表达与患者年龄、吸烟无关。  4.前列腺癌中c-Met的高表达与MACC1的高表达呈正相关(P<0.01)。  5.前列腺癌组织中Ⅱ期与Ⅲ期术后骨转移发生率存在统计学差异(P<0.05)。  6.前列腺癌组织中 c-Met高表达组无骨转移生存率低且生存时间短;MACC1高表达组无骨转移生存率低且生存时间短。  7.前列腺癌不同细胞系(C4-2、LNCAP、PC-3细胞)中有c-Met表达,且存在差异(P<0.01),在AR阴性的前列腺癌细胞PC-3中c-Met平均光密度最高,AR阳性雄激素非依赖型前列腺癌细胞C4-2其次,AR阳性雄激素依赖型前列腺癌细胞LNCAP中c-Met平均光密度最低。此结果与western blot实验结果相同。  8.前列腺癌不同细胞系(C4-2、LNCAP、PC-3细胞)中有MACC1表达,且存在差异(P<0.05),在AR阳性雄激素非依赖型前列腺癌细胞C4-2中c-Met平均光密度最高,AR阴性的前列腺癌细胞PC-3其次,AR阳性雄激素依赖型前列腺癌细胞LNCAP中c-Met平均光密度最低。此结果与western blot实验结果相同。  结论:  1.前列腺增生组织也存在c-Met和MACC1的表达,这说明两者在前列腺增生的过程起到一定作用;在已发生转移的前列腺癌组织中c-Met和MACC1的表达率均高于前列腺增生组织,可能提示两者在在前列腺癌发生转移中起重要作用。  2.在前列腺癌组织中 c-Met及 MACC1表达情况与不同病理分级、Gleason分级、PSA水平及根治术后是否发生骨转移有关,提示c-Met和MACC1异常表达可能与前列腺癌的恶性程度及浸润能力密切相关。  3.c-Met和MACC1的表达在前列腺癌组织中呈现正相关关系,在前列腺癌的发生、进展的过程中可能起到相互协同的作用。  4.在前列腺癌组织中c-Met及MACC1的表达水平与无骨转移生存时间及生存率密切相关,其高表后更易出现骨转移,可能成为早期预测骨转移的相关指标。  5.前列腺癌不同细胞系中 c-Met及 MACC1的表达存在差异,推测 AR与c-Met、MACC1之间的关系,为雄激素抵抗性前列腺癌寻找新的治疗靶点。
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